眼科光学 接触镜和接触镜护理产品 接触镜结合接触镜护理液评价接触镜和护理液相互作用的细胞毒性试验.pdfVIP

眼科光学接触镜和接触镜护理产品基于接触镜结合接触镜护理液

评价其相互作用的细胞毒性试验

1范围

本文件规定了用于评价接触镜与接触镜护理液相互作用可产生的潜在细胞毒性作用的一种体外试

验方法。

本文件适用于接触镜与接触镜护理液产品。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

ISO18369-1眼科光学接触镜第1部分：词汇、分类系统和推荐的标识规范（Ophthalmic

optics—Contactlenses—Part1:Vocabulary,classificationsystemandrecommendationsforlabelling

specifications）

注：GB/T11417.1-2012眼科光学接触镜第1部分：词汇、分类和推荐的标识规范（ISO18369-1:2006，MOD）

3术语和定义

ISO18369-1界定的以及下列术语和定义适用于本文件。

3.1

室温roomtemperature

室温定义为18℃～25℃。

4原理

接触镜护理液中的化学物质可能通过直接接触或通过接触镜间接接触眼部组织而引起细胞毒性反

应。接触镜对护理产品防腐剂或其他溶液成分的吸收以及这些化学物质随后在眼部环境中的释放可能损

害眼部的生物相容性。在设计试验时宜考虑接触镜护理产品和各种接触镜材料之间的潜在相互作用，以

全面评价某种新型接触镜或接触镜护理产品的潜在细胞毒性。

5接触镜结合接触镜护理液的直接接触细胞毒性试验

5.1通则

1

以下方案描述了评价浸泡在接触镜护理液中的接触镜潜在细胞毒性的试验方法。细胞毒性可能来自

于接触镜和接触镜护理液的相互作用。

除日抛型接触镜外，应评价新型接触镜与市售代表性多功能护理液的潜在相互作用产生细胞毒性的

可能性。

为了评价新型接触镜护理液，应评价新型接触镜护理液与代表性接触镜的潜在相互作用产生细胞毒

性的可能性。

5.2试验步骤

5.2.1基本步骤

将测试的接触镜置于装有约10mL接触镜护理液的无菌相容容器中，在室温下孵育24h±2h。同样，

在室温下，在相同类型的容器中，将接触镜在约10mL的杜氏磷酸盐缓冲液（DPBS）中孵育24h±2h，

2+2+

以制备用含有Ca和Mg的DPBS处理过的对照接触镜（“接触镜对照”）。

本文件中，相容容器是指几乎不吸收消毒剂和/或防腐剂的容器。用接触镜护理产品润洗容器可减

少容器的吸收。

浸泡24h±2h后，可以风车方式切割接触镜（大约在接触镜的1/3～1/2处切3～4刀）并立即用于细

胞毒性试验。如果不切开接触镜，应以凹入的方式置于细胞上。将每片接触镜置于直径为60mm的组织

培养板中细胞表面的中心，该培养板中含有近汇合单层L-929细胞，培养于含5%胎牛血清（FBS）的1.6mL

最低限量基本培养基（MEM）中。

同样，将阴性和阳性对照置于含有近汇合单层L-929细胞的直径为60mm的组织培养板中，培养于含

5%FBS的1.6mLMEM中。

将组织培养板在37℃±1℃，5％±1％二氧化碳（CO）培养24h±2h。2

培养结束后，将接触镜和对照组从每个培养板中取出，用台盼蓝对细胞进行染色，以方便观察死亡

或受损细胞。细胞毒性的评估是通过评价测试材料和对照材料周围细胞在肉眼和显微镜下（100倍）是

否有任何异常的细胞形态以及裂解，并确定裂解区（若有）。

5.2.2材料

5.2.2.1细胞系

L-929细胞【NCTC克隆929：CCL1，美国典型培养物保藏中心(ATCC)，美国弗吉尼亚州马纳萨

斯；ECACCNo等同物，欧洲认证细胞培养物保藏中心，英国威尔特郡索尔兹伯里，邮编

SP40JG】。细胞培养物应不含支原体。

用于试验的细胞的传代数宜在10～30代以内。

5.2.2.2技术设备

5.2.2.2.1培养箱，37℃±1℃，湿化，5％±1％二氧化碳（CO）/空气。2

5.2.2.2.2