PCR的影响因素及解决方法.docx

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PCR的主要影响因素及常见问题解决方法

第一局部、PCR的主要影响因素

PCR技术必需有人工合成的合理引物和提取的样品DNA,然后才进展自动热循环,最终进展产物鉴定与分析。引物设计与合成目前只能在少数技术力气较强的争论院、所进展,临床应用只需购置PCR检测试剂盒就可开展工作,PCR自动热循环中影响因素很多,对不同的DNA样品,PCR反响中各种成份参加量和温度循环参数均不全都。现将几种主要影响因素介绍如下。

一、温度循环参数

在PCR自动热循环中,最关键的因素是变性与退火的温度。如操作范例所示,其变性、退火、延长的条件是:94℃60s,37℃60s,72℃120

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