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血型鉴定作业指导书

检验原理

排阻层析原理，即在微柱凝胶介质中，红细胞抗原与相应抗体结合，形成红细胞免疫复合物，在一定离心力下，该复合物不能通过凝胶间隙而浮于胶表面或悬于胶中；如无相应

抗体结合，则不能形成红细胞免疫复合物，在一定离心力下，分散的红细胞可以通过凝胶间隙沉于微柱腔底部。

样本

病人准备：任何时候只要需要，坐着或躺着抽血。

标本类型：静脉血血

2.3标本拒收标准：

2.3.1溶血标本。

2.3.2血量少于1ml。

2.3.3标本试管未贴条码。

2.3.4标本长菌。

2.3.5不是当天标本。

检验材料

试剂：ABO、RhD血型定型检测卡(单克隆抗体)、ABO血型反定型试剂盒(人血红细胞)

3.1.1试剂组成

ABO、RhD血型定型检测卡：聚丙烯塑料透明卡片，卡片上并排六支微柱型管中充填葡聚糖凝胶，从左向右顺序第一支至第三支微管凝胶中分别充填抗A(24#和15B4,或A1H1和A2B3，鼠单克隆抗体，或上海血液生物医药与法国DIGAST公司混合液)、抗B(13B1和3C8或B1A8和B1C2，鼠单克隆抗体，或上海血液生物医药与法国DIGAST公司混合液)、抗D(BS226，鼠单克隆抗体)IgM试剂，称之为特异性胶，检测人红细胞ABO、RhD抗原。第四支至第六支微管中只有凝胶，称之为中性胶，第四支微管作为阴性对照管；第五支和第六支微管作为ABO血型反定型管。

ABO血型反定型试剂盒：每盒有A1、B、O细胞各一瓶。

3.1.2储存条件及有效期

ABO、RhD血型定型检测卡：2~25℃避光保存。有效期12个月。

ABO血型反定型试剂盒：2~8℃避光保存。有效期自检定合格之日起为90天。

质控品：ABO、Rh血型检测质控品（微住凝胶法）

操作程序

仪器：Blozer120血型仪

操作步骤：

4.2.1手工法

4.2.1.1将微柱凝胶试剂卡的六支凝胶微管标号。

4.2.1.2将待检者0.5%~0.8%红细胞悬液分别加入第一至第四支微管中，每管50μl。

4.2.1.3将待检者血清分别加入第五支和第六支微管中，每管50μl。

4.2.1.4将已知A型和B型红细胞0.5%~0.8%浓度悬液分别加入第五和第六支微管中，每管50μl。

4.2.1.5即刻使用专用离心机离心5分钟，900rpm2分钟，1500rpm3分钟，取出肉眼判定结果。

4.2.2仪器法

4.2.2.1实验准备：

打开设备电源开关、电脑电源开关。

4.2.2.1.2放置好实验需要的检测卡，条码向外放置。

4.2.2.1.3检查、放置好实验需要的吸头、试剂、深孔板、稀释液、配重卡。

4.2.2.1.4检查废卡仓确保有足够空间。

4.2.2.2开机

4.2.2.2.1点击桌面血库软件图标，选择登录用户，输入密码，进入软件，界面如下：

4.2.2.2.2点击软件右上角开机按钮：，系统开始初始化，初始化完毕，系统提示选择吸头初始位置：（系统默认为每列第一个）

4.2.2.2.3系统继续弹出如下对话框：点【更换】会使用全新的微孔板，点【不更换】会沿用上次实验的微孔板

4.2.2.2.4请移除桌面多余的卡并点击【确定】：

4.2.2.2.5完成以上步骤后，系统进入待机状态，软件界面如下：

4.2.2.3标本检测：

4.2.2.3.1点击常规检测按钮：，弹出输入样本条码界面，如下图所示：

4.2.2.3.2对标本进行扫描插入，或者手动输入标本号，点击【正常测试】，会出现如下界面：

4.2.2.3.3点击【确定】开始标本检测。

4.2.2.4检测结果：

点击软件左下角的测试结果按钮：，界面如下：

此时可对当天结果、历史结果进行查询、修改、复核、打印、传输（选择结果单机鼠标右键）等操作。

4.2.2.5关机

4.2.2.5.1实验结束后，在首页里点击关机按钮：，点是退出软件。

4.2.2.5.2将剩余检测卡、试剂等放入冷藏柜

4.2.2.5.3及时处理深孔板

4.2.2.5.4清理废针桶、废卡桶

4.2.2.5.5清理擦拭台面

4.2.2.5.6关闭设备电源开关、电脑开关，实验结束。

质量控制及失控处理

使用ABO、Rh血型检测质控品，根据其在长春博迅生物技术有限责任公司的以上微柱凝胶血型卡的阳性及阴性检测结果，通过每天或每批与待检标本相同的检测，以监测AB0、Rh检测过程中应用的试剂、设备及实验流程是否符合标准操作规程的规定，并评估实验结果的有效性。

检验结果的解释

6.1结果判读：

6.1.1结果判定

阳性结果：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原复合物浮在凝胶表面或胶中，为阳性反应。

反应强度：特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶表面，为强阳性反应；复合物在胶中为弱阳性反应；愈靠近胶底部颗粒愈小，反应愈弱。