注射衣霉素诱导急性肝损伤小鼠模型的构建方法.pdf

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(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号CN113647359A

(43)申请公布日2021.11.16

(21)申请号202110933719.0

(22)申请日2021.08.15

(71)申请人芜湖职业技术学院

地址241003安徽省芜湖市弋江区文津西

路201号

(72)发明人杨兰香黄昭郭豪杰程旺开

熊冉张佳佳

(74)专利代理机构江苏海越律师事务所32402

代理人唐小红

(51)Int.Cl.

A01K67/027(2006.01)

A61D7/00(2006.01)

权利要求书3页说明书5页

(54)发明名称

注射衣霉素诱导急性肝损伤小鼠模型的构

建方法

(57)摘要

本发明公开了注射衣霉素诱导急性肝损伤

小鼠模型的构建方法，将配置好的浓度为0.1μ

g/μl衣霉素(TM)溶液通过腹腔注射的给药方式

注射到小鼠体内，12h后采用颈椎脱臼方法处死

小鼠并收集血液、肝脏组织进行形态、病理及生

化指标分析。该方法不仅操作简便、建模周期短、

建模成功率高、生物利用率高，而且为建立急性

肝损伤模型小鼠提供了新思路，同时为研究肝损

伤及病情进展的发病机制提供实验工具，为临床

肝病的预防、治疗提供理论基础。

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CN113647359A权利要求书1/3页

1.注射衣霉素诱导急性肝损伤小鼠模型的构建方法，其特征在于，需要以下步骤：

1)衣霉素溶液的配制；

1‑1)150mM葡萄糖溶液的配制：精密称取810.72mg葡萄糖溶于30ml灭菌水中，震荡溶

解；

1‑2)0.1μg/μl衣霉素TM溶液的配制：精密称取1mg衣霉素粉末溶解于100μl二甲亚砜

(DMSO)中，再加入10ml的150mM葡萄糖溶液，震荡溶解，4℃保存；

1‑3)1％DMSO对照液的配制：取100μl二甲亚砜DMSO溶液加入到10ml的150mM葡萄糖溶

液，震荡溶解，4℃保存；

2)将7周龄C57BL/6小鼠按体重大小随机分成对照组和实验组两组，每组数量按需要分

配，实验组开始腹腔注射步骤1‑2)中配制的TM溶液100μl/10g，与此同时对照组腹腔注射步

骤1‑3)中配制的1％DMSO对照液100μl/10g，12h后处死取材；

3)观察肝脏形态、病理图并检测肝损伤相关的生化指标。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中小鼠的体重为18g‑20g，均为SPF级，

饲养于SPF级动物房一周，饲养环境为温度25℃、湿度为50％‑55％、光照12h黑暗12h、自由

进食和饮水，一周后按体重随机分为对照组。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中腹腔注射时的步骤：吸取药品，并去

除气泡；将针头向上，吸取一段气体后，在缓慢排除气体，以达到取出气泡的效果；用一只手

抓住小鼠的尾巴向后拉，另一只手的大拇指和食指抓小鼠的头背部皮毛，腹腔向上；将事先

吸取好液体的注射器针尖平面朝上，平行扎入皮内后，注射器与腹腔呈45度角刺入腹腔，感

觉针尖部分移动，注射样品。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤2)中，对照组给药具体如下：

每一只小鼠称重并记录体重，按照体重来给药，每10g的重量腹腔