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艾滋病病毒抗体快速检测技术及生物安全培训郑州市疾病预防控制中心性病艾滋病防治所主要内容艾滋病基础知识检测试剂的选择;样本采集及使用注意事项;检测策略及流程;实验记录;结果报告与告知;检测质量控制;生物安全及个人防护。艾滋病基础知识---定义艾滋病(AIDS):由人类免疫缺陷病毒(HIV)所引起的一种以辅助性T淋巴细胞(CD4+T淋巴细胞)数量减少导致免疫功能减退为主要特征的严重传染性疾病。---来源20世纪40-50年代的非洲,HIV病毒可能由猴子体内的猿免疫缺陷病毒演变而来---感染的自然发展过程窗口期:受到HIV感染到可以检测出艾滋病抗体的这一段时间特点:轻微的一过性感冒症状在窗口期内检测不出抗体感染(HIV-1)2-3周可检出P24抗原感染者的血液、精液、阴道分泌物等体液中,含有大量HIV无症状潜伏期:8-10年特点:HIV抗体+临床症状出现:平均10年的潜伏期后出现艾滋病病人:临床症状出现后1年发展为病人死亡:无抗病毒治疗情况下,半年到2年的时间,病人死于艾滋病HIV抗体(-)HIV抗体(+),无症状有症状HIV抗体+艾滋病4-8周8—10年1年0.5—2年左右个体感染艾滋病病毒后的自然发展过程HIV抗体检测的主要技术依据《全国艾滋病检测技术规范》(2009年修订版);《艾滋病病毒抗体快速检测技术手册》(2011版);《病原微生物实验室生物安全管理条例》《实验室生物安全通用要求》(GB-19489-2004)《全国艾滋病检测工作管理办法》检测试剂的选择快速检测是相对于酶联检测,获得结果时间较短而言。其特点是:1、可以较快获得检测结果;2、可用全血(末梢血)或静脉血检测,样本容易采集;3、只需较少的实验设备;4、可以直观地判定和解释结果。检测试剂的选择1、必须使用经国家食品药品监督管理局注册批准的快速试剂;(/)2、试剂必须在有效期内使用;3、根据目的选择试剂:初筛选择敏感性高的试剂;复检选择特异性高的试剂;4、推荐:使用临床评估质量好并且近几年连续考评结果稳定的试剂()。检测试剂的选择HIV快速检测试剂按原理不同,分为以下三类:免疫渗滤试验:以硝酸纤维膜为载体,HIV抗原点状固定在膜上。加待检样品后,阳性结果在膜上抗原部位显示出有色斑点。有效试验质控点必须显色。免疫层析试验:以硝酸纤维膜为载体,HIV抗原线状固定在膜上,加待检样品后,阳性结果在膜上抗原部位显示出有色条带。有效试验的质控带必须显色。明胶颗粒凝集试验(PA):将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体,加待检样品后。当待检样品含有HIV抗体时,明胶颗粒与抗体发生凝集反应,根据凝集情况判读结果。胶体金快速试剂实物样本采集及使用注意事项用于快速检测的样品可以为血清、血浆或全血(末梢血或静脉血)。采样前的准备:1、按照临床采血技术规范的要求操作,遵守生物安全要求。2、应检查受检者信息与样品收集试管表面的标记是否一致,注明样品采集时间。3、检测试剂是否过期。样本采集及使用注意事项不在现场检测的样品,通常采集5毫升静脉血,现场分离血清或血浆后直接送到相关的检测点或筛查实验室。填写快速检测记录,记录受检者的详细信息,对于阳性反应者,应核对被检测者的信息,重新采集全血,分离血清或血浆,填写样品送检单,连同样品一同转送到上级实验室,如果路程较远或气候炎热时,装有样本的容器加冰运送。检测策略及流程---初筛试验---复检试验---确证试验应急检测胶体硒法(免疫层析法)在使用试剂前必须仔细阅读说明书,需严格按照说明书执行,否则无法保证可靠的结果原理:以硝酸纤维膜(玻璃纤维膜)为载体。是一种用免疫层析法定性测定血样中HIV1/2抗体,加样本入反应条,当样品迁移通过结合物包被处,与硒胶体-抗原结合物重组结合,此混合物继续迁移通过固相包被的合成肽和重组抗原的病人结果窗口胶体硒法(免疫层析法)
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