病毒感染实验诊断.pptx

病毒感染实验诊断;然后依据可疑病毒生物学特点、

机体免疫应答和临床过程，以及

病人当前所处时机，确定试验

诊疗方法。

;1.对潜伏期短，发病时尚无抗体产

生，可选择测定病毒颗粒、病毒

抗原或核酸。;2.对潜伏期超出十天感染，可

检测特异性IgM抗体来进行早

期快速诊疗，及区分首次和再

次感染。

;3.对可在体内形成连续感染或潜伏

感染病毒，可检测急性期和恢

复期双份血清IgG抗体有没有4倍

以上升高，或直接检测病毒核酸。;4.对原因不明或有新病毒感染时，

应采集标本进行病毒分离，同

时应采取双份血清以确认分离

病毒为病原体。;5.对同一症状可有各种病毒引发

情况，应同时检测几个相关病毒

病毒颗粒、抗原或抗体，

6.对由多个型别组成病毒可测定

它们共同抗原。

;第一节标本采集与运输;2.标本种类选择依据临床感染

症状及流行病学资料，判断可

能感染病毒种类，选择对应部位

采取标本。

;常见分离病毒标本选择;3．常见标本采集方法;(2)脑脊液：以无菌取脑脊液

1～2ml，冰浴马上送检。

在4℃可存放72h。用于分

离柯萨奇病毒、ECHO病毒、

肠道病毒、腮腺炎病毒。;(3)宫颈或阴道拭子：采取病灶部

位分泌物，或将拭子伸人宫颈

约lcm停留5秒取出，冰浴马上

送检。用于分离HSV、CMV。

;(4)粪便标本：取2～4ｇ粪便加

10ml运输液马上送检，用于

分离腺病毒、肠道病毒和轮

状病毒。

;(5)含漱液：用无菌生理盐水让

患者含漱。用于分离流感病

毒、副流感病毒、鼻病毒、

RSV等。

;(6)喉拭子：用压舌板防止唾液

污染，用拭子采取咽喉部表

面。用于分离腺病毒、CMV、

肠道病毒、HSV、流感病毒等。;(7)尿道拭子及尿液标本：尿道拭

子伸人尿道4cm转动3次，以获

得较多上皮细胞，用于分离

CMV和HSV。

(8)尸检标本：死亡后尽早采集各

种器官，分别使用器械和容器。

;二、标本运输和保留

;病毒传送培养基以Hanks液为基础加

灭活小牛血清。为抑制细菌生长加

青霉素100U／ml和链霉素100μg／ml，

为了抑制真菌生长加入2．5μg／ml

二性霉素B或40μg／ml制霉菌素。

;第二节病毒分离与判定

;(2)二倍体细胞株：仍保持二倍体

特征。寿命普通为40～50代，

如人胚肺细胞。广泛用于病毒

分离和疫苗制备。

;(3)传代细胞系：来于肿瘤细胞，

染色体特征类似肿瘤细胞。

常见有些人宫颈癌细胞(Hela)、

人喉上皮癌细胞(Hep-2)。

;2．鸡胚接种鸡胚是用于分离粘

病毒科、疱疹病毒、痘类病毒

较为理想材料。

;3．动物接种动物对病毒敏感

性是不一样，选择适当动物十

分主要。小鼠、乳鼠、家兔、

豚鼠、猴等常见于分离病毒。

;常见于病毒分离细胞;三、病毒判定;2.动物感染范围及特点病毒感

染动物范围、发病潜伏期。

3.细胞培养特点。

综合上述资料作出判定。

;病毒判定方法;②不出现细胞病变现象。

③细胞培养液pH改变。

;2.中和试验;用于病毒分型诊疗最具敏感和

准确性。也可用于检验患者病后

或人工免疫后，机体血清中抗体

增加情况。

;3.空斑或蚀斑形成试验

空斑是指在单层细胞中被病毒感染引

起死亡细胞区域，周围被活细胞包

围。普通而言，一个空斑是由一个感染

性病毒颗粒感染所引发。不一样病毒

引发空斑形态和大小不一样。可进行病

毒颗粒计数、纯化，结合中和试验可

进行病毒判定。;4.干扰现象

一些病毒间存在着干扰现象，

如一些型别鼻病毒能干扰

以后进入副流感病毒增

殖，从而阻抑后者红细胞

吸附作用。

;5.红细胞吸附及吸附抑制试验;可作为初步判定。假如在培养瓶

中加入对应血凝素抗血清后，

不出现红细胞吸附现象，是为红

细胞吸附抑制试验阳性，可作为

病毒判定依据。

;4．血凝试验及血凝抑制试验

一些病毒可与一定种类哺乳

动物或禽类红细胞产生血凝

现象。加入对应血凝素抗体

可抑制血凝现象发生，是为

血凝抑制试验。可作为病毒型

别确定依据。;5．病毒大小及形态

可用电子显微镜观察病毒

大小及形态。

;6．核酸类型判别及序列测定;对病毒核酸特异序列或全序列

碱基排列测定或DNA杂交、DNA-

RNA杂交来判定病毒。

;7．耐酸试验

肠道病毒对酸