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病毒感染实验诊断;然后依据可疑病毒生物学特点、
机体免疫应答和临床过程,以及
病人当前所处时机,确定试验
诊疗方法。
;1.对潜伏期短,发病时尚无抗体产
生,可选择测定病毒颗粒、病毒
抗原或核酸。;2.对潜伏期超出十天感染,可
检测特异性IgM抗体来进行早
期快速诊疗,及区分首次和再
次感染。
;3.对可在体内形成连续感染或潜伏
感染病毒,可检测急性期和恢
复期双份血清IgG抗体有没有4倍
以上升高,或直接检测病毒核酸。;4.对原因不明或有新病毒感染时,
应采集标本进行病毒分离,同
时应采取双份血清以确认分离
病毒为病原体。;5.对同一症状可有各种病毒引发
情况,应同时检测几个相关病毒
病毒颗粒、抗原或抗体,
6.对由多个型别组成病毒可测定
它们共同抗原。
;第一节标本采集与运输;2.标本种类选择依据临床感染
症状及流行病学资料,判断可
能感染病毒种类,选择对应部位
采取标本。
;常见分离病毒标本选择;3.常见标本采集方法;(2)脑脊液:以无菌取脑脊液
1~2ml,冰浴马上送检。
在4℃可存放72h。用于分
离柯萨奇病毒、ECHO病毒、
肠道病毒、腮腺炎病毒。;(3)宫颈或阴道拭子:采取病灶部
位分泌物,或将拭子伸人宫颈
约lcm停留5秒取出,冰浴马上
送检。用于分离HSV、CMV。
;(4)粪便标本:取2~4g粪便加
10ml运输液马上送检,用于
分离腺病毒、肠道病毒和轮
状病毒。
;(5)含漱液:用无菌生理盐水让
患者含漱。用于分离流感病
毒、副流感病毒、鼻病毒、
RSV等。
;(6)喉拭子:用压舌板防止唾液
污染,用拭子采取咽喉部表
面。用于分离腺病毒、CMV、
肠道病毒、HSV、流感病毒等。;(7)尿道拭子及尿液标本:尿道拭
子伸人尿道4cm转动3次,以获
得较多上皮细胞,用于分离
CMV和HSV。
(8)尸检标本:死亡后尽早采集各
种器官,分别使用器械和容器。
;二、标本运输和保留
;病毒传送培养基以Hanks液为基础加
灭活小牛血清。为抑制细菌生长加
青霉素100U/ml和链霉素100μg/ml,
为了抑制真菌生长加入2.5μg/ml
二性霉素B或40μg/ml制霉菌素。
;第二节病毒分离与判定
;(2)二倍体细胞株:仍保持二倍体
特征。寿命普通为40~50代,
如人胚肺细胞。广泛用于病毒
分离和疫苗制备。
;(3)传代细胞系:来于肿瘤细胞,
染色体特征类似肿瘤细胞。
常见有些人宫颈癌细胞(Hela)、
人喉上皮癌细胞(Hep-2)。
;2.鸡胚接种鸡胚是用于分离粘
病毒科、疱疹病毒、痘类病毒
较为理想材料。
;3.动物接种动物对病毒敏感
性是不一样,选择适当动物十
分主要。小鼠、乳鼠、家兔、
豚鼠、猴等常见于分离病毒。
;常见于病毒分离细胞;三、病毒判定;2.动物感染范围及特点病毒感
染动物范围、发病潜伏期。
3.细胞培养特点。
综合上述资料作出判定。
;病毒判定方法;②不出现细胞病变现象。
③细胞培养液pH改变。
;2.中和试验;用于病毒分型诊疗最具敏感和
准确性。也可用于检验患者病后
或人工免疫后,机体血清中抗体
增加情况。
;3.空斑或蚀斑形成试验
空斑是指在单层细胞中被病毒感染引
起死亡细胞区域,周围被活细胞包
围。普通而言,一个空斑是由一个感染
性病毒颗粒感染所引发。不一样病毒
引发空斑形态和大小不一样。可进行病
毒颗粒计数、纯化,结合中和试验可
进行病毒判定。;4.干扰现象
一些病毒间存在着干扰现象,
如一些型别鼻病毒能干扰
以后进入副流感病毒增
殖,从而阻抑后者红细胞
吸附作用。
;5.红细胞吸附及吸附抑制试验;可作为初步判定。假如在培养瓶
中加入对应血凝素抗血清后,
不出现红细胞吸附现象,是为红
细胞吸附抑制试验阳性,可作为
病毒判定依据。
;4.血凝试验及血凝抑制试验
一些病毒可与一定种类哺乳
动物或禽类红细胞产生血凝
现象。加入对应血凝素抗体
可抑制血凝现象发生,是为
血凝抑制试验。可作为病毒型
别确定依据。;5.病毒大小及形态
可用电子显微镜观察病毒
大小及形态。
;6.核酸类型判别及序列测定;对病毒核酸特异序列或全序列
碱基排列测定或DNA杂交、DNA-
RNA杂交来判定病毒。
;7.耐酸试验
肠道病毒对酸
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