课题血红蛋白的提取和分离.ppt

2.凝胶色谱操作2.1凝胶色谱柱的制作取胶皮盖打孔安装玻璃管安装尼龙网安装100目尼龙纱组装完成！第21页,共48页，星期六，2024年，5月2.2凝胶色谱柱的装填材料：交联葡聚糖凝胶（G-75）A、固定：将色谱柱装置固定在支架上B、装填：将凝胶悬浮液一次性的装填入色谱柱内装填方法：C、洗涤平衡：装填完毕后，用磷酸缓冲液缓冲液充分洗涤平衡12小时第22页,共48页，星期六，2024年，5月2.3样品的加样和洗脱A、调节缓冲液面B、滴加透析样品C、样品渗入凝胶床D、洗脱第23页,共48页，星期六，2024年，5月E、收集待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每5ml收集一试管，连续收集。实验结果第24页,共48页，星期六，2024年，5月1.样品的处理血液离心后分层实验结果与分析成功！第25页,共48页，星期六，2024年，5月1.洗涤次数过少，未能除去血浆蛋白。2.离心速度过高和时间过长，白细胞和淋巴细胞一同沉淀。失败原因：第26页,共48页，星期六，2024年，5月2.凝胶色谱柱装填加入有色物质，观察色带移动情况。方法：血红蛋白色带狭窄、均匀、平整血红蛋白色带歪曲、散乱、变宽第27页,共48页，星期六，2024年，5月相关链接为什么有的血管是蓝色的？携氧的血是鲜红色的，当你被划伤时，你看到的是鲜红的携氧血。不携氧的血是深紫色的，当你献血时，血被抽到没有氧气的试管里，你看到的血是深紫色的。深紫色的无氧血流经我们的静脉时却呈蓝色为什么第28页,共48页，星期六，2024年，5月不同的光线透过皮肤的方式不同：蓝光在皮肤表面被反射回来；红光透射得比较深；静脉中深色的血吸收大部分红光。所以我们看到的是皮肤表面反射的蓝光。另外一些生物，如蛇类和蟹类，用铜来运输氧气，所以他们有真正的蓝血。第29页,共48页，星期六，2024年，5月课堂小结缓冲溶液：在一定的范围内，能够抵制外加少量强酸或强碱，使原来溶液PH值基本保持不变的混合溶液。凝胶色谱法：根据被分离的蛋白质相对分子质量的大小，利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用，来进行分离的方法。第30页,共48页，星期六，2024年，5月带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。电泳：实验过程1.样品处理红细胞的洗涤血红蛋白的释放分离血红蛋白溶液透析第31页,共48页，星期六，2024年，5月2.凝胶色谱操作凝胶色谱柱的制作凝胶色谱柱的装填样品的加入和洗脱3.SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳第32页,共48页，星期六，2024年，5月高考链接1.2009.山东

细胞分化是奢侈基因选择性表达的结果。下列属于奢侈基因的是（）A.血红蛋白基因B.ATP合成酶基因C.DNA解旋酶基因D.核糖体蛋白基因A第33页,共48页，星期六，2024年，5月解析：题干中给予“细胞分化是奢侈基因选择性表达的结果”，根据题干可知，找出分化的细胞中特殊成分的基因即可，四个选项中BCD是所有活细胞中都具体的基因，而A.血红蛋白基因是分化后的红细胞才表达的基因。第34页,共48页，星期六，2024年，5月2.2003全国卷Ⅰ·理综能与人体血液中血红蛋白结合的一种有毒气体是()A.氯气B.氮气C.一氧化碳D.甲烷C解析：CO与血红蛋白结合，造成CO中毒，即煤气中毒。第35页,共48页，星期六，2024年，5月课堂练习填空题1.样品处理中的血红蛋白溶液离心后分层顺序自上而下是（）-----（）----（）----（)。有机溶剂脂类物质红细胞破碎物沉淀血红蛋白溶液2.一分子血红蛋白最多可携带()O2分子数和（）CO2分子数。１个１个第36页,共48页，星期六，2024年，5月选择题1.随着人类跨入蛋白质组时代，对蛋白质的研究和应用越来越深入，首先要做的一步是（）A.弄清各种蛋白质的空间结构B.弄清各种蛋白质的功能C.弄清各种蛋白质的合成过程D.获得高纯度的蛋白质Ｄ第37页,共48页，星期六，2024年，5月2.用凝胶色谱法分离