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烟草的再生

前言

植物的组织培养广义又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细

胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植

株或生产具有经济价值的其他产品的技术。狭义是指组培指用植物各部分组织，如

形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中

从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。

在实践中，根据所培养的植物材料的不同，可以把组织材料分为5种类型，即愈

伤组织、悬浮细胞培养、器官培养（胚、花药、子房、根和茎的培养等）、茎尖分生

组织和原生质体培养。这5种培养类型虽然各有特点，但又相互有联系。例如，愈

伤组织常常是悬浮细胞和原生质体的来源，但是很多情况下，悬浮细胞和原生质体

最终又要通过形成愈伤组织才能产生再生植株。

19世纪30年代，德国植物学家施莱登和德国动物学家施旺创立了细胞学说，根

据这一学说，如果给细胞提供和生物体内一样的条件，每个细胞都应该能够独立生

活。1902年，德国植物学家哈伯兰特在细胞全能性的理论是植物组培的理论基础。

1958年，一个振奋人心的消息从美国传向世界各地，美国植物学家斯蒂瓦特等人，

用胡萝卜韧皮部的细胞进行培养，终于得到了完整植株，并且这一植株能够开花结

果，证实了哈伯兰特在五十多年前关于细胞全能的预言。植物组培的简单过程如下：

剪接植物器官或组织——经过脱分化形成愈伤组织——再经过再分化形成组织或器

官——经过培养发育成一颗完整的植株。植物组培的大致过程是：在无菌条件下，

将植物器官或组织（如芽、茎尖、根尖或花药）的一部分切下来，用纤维素酶与果

胶酶处理用以去掉细胞壁，使之露出原生质体，然后放在适当的人工培养基上进行

培养，这些器官或组织就会进行细胞分裂，形成新的组织。不过这种组织没有发生

分化，只是一团薄壁细胞，叫做愈伤组织。在适合的光照、温度和一定的营养物质

与激素等条件下，愈伤组织便开始分化，产生出植物的各种器官和组织，进而发育

成一棵完整的植株。

植物组织培养具有很多优点。第一，其培养条件可以人为控制，摆脱了大自然中

四季、昼夜的变化以及灾害性气候的不利影响，且条件均一，对植物生长极为有利，

便于稳定地进行周年生培养。第二，其生长周期短，繁殖率高。第三，管理方便，

利于工厂化生产和自动化控制，与盆栽、田间栽培等相比省去了中耕除草、浇水施

肥、防治病虫等一系列繁杂劳动，可以大大节省人力、物力及田间种植所需要的土

地。

组织培养一方面可为转基因育种提供理想的受体材料，另一方面又可为常规的植

物改良程序提供一种新的手段，从而使很多用传统方法难以解决的问题迎刃而解，

更多更快地创造出各种农作物和园艺植物的新品种、新类型和新种质。总的来看，

组织培养在植物改良中发挥了主要的作用，相信随着培养的技术不断的进步，其将

会发挥更大的作用。

一、实验目的

1.了解与掌握植物组织培养的原理和过程。

2.了解与学习植物组织培养的相关操作技术。

3.通过学习植物组织培养技术学习自我总结、自我反思，让自己在今后的学习与生

活中也能像做组织培养那样细心、有条理。

二、实验原理

动物细胞的分化一般是不可逆的，植物则不同。只要具有一个完整的膜系统和一

个有生命力的核，即使是已经高度成熟和分化的细胞，也还保持着回复到分生状态

的能力。

把已分化组织中不分裂的静止细胞从母体植株上分离下来置于一种能促进细胞

增殖的培养基上培养，细胞内就会发生某些变化，例如在休止期间由于溶酶体的破

坏活动而丧失了功能的细胞组分又恢复了功能等，从而使细胞进入分生状态。一个

成熟转变为分生状态并形成未分化的愈伤组织的现象称作“脱分化”。在组织培养中，

把如上述由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官叫做外植体。外植

体通常都是多细胞的，并且组成它们的细胞常常包括各种不同的类型，因此由一个

外植体所形成的愈伤组织也是异质性的，其中不同的组分细胞具有不同的形成完整

植株的能力，即不同的“再分化”能力。

一个植物细胞能产生一个完整植株的固有能力称这为细胞的全能性（Cell

totipotency）。换句话说，细胞全能性是指植物细胞具有全套遗传信息，不管是性细

胞还是体细胞，在特定环境下仍能进行表达，而产生一个独立完整的个体。

细胞一旦脱离了母体植株，摆脱了原来所受到的遗传上的控制和生理上的制约，

在一定的培养条件下，就会发生一种回复变化，从而失去分化状态，变为分生细胞，

实