维生素B生产工艺的进展专家讲座.pptx

目录维生素B12介绍维生素B12产生方式维生素B12菌种选育（原因方法）提升产率其它方法传统工艺发酵工艺改进二步发酵工艺膜反应器单一膜反应器与二步发酵工艺相结合膜反应器一体式膜反应器膜反应器与其它技术联用结论维生素B生产工艺的进展专家讲座第1页

维生素B12介绍维生素B12(VB12)，又称钴胺素(cyanocoba—lamin)，是一个含有钴咕啉类有机化合物，分子式C63H88CoN14O14P。是人体组织代谢过程中所必需维生素，是人和其它哺乳动物维持生长和促进红细胞生长主要因子，在临床上用于治疗恶性贫血和恢复造血功效等。维生素B生产工艺的进展专家讲座第2页

维生素B12产生方式由各种细菌和放线菌中产生早期从抗生素，如链霉素、新霉素、氯霉素和庆大霉素等发酵废液中提取VB12。从天然肥料或土壤中分离出能产生VB12菌株。1992年Ko—jima等首次报道，从568份土壤样品中分离出500种能够消解异丙醇并产生VB12微生物。诺卡氏菌、棒状菌、芽孢杆菌、乙酸杆菌和丁酸杆菌属细菌也能产生VB121991年Inoue等从海底沉积物中分离出一个新厌氧型乙酸杆菌属菌株69，能够产生胞内VB12。维生素B生产工艺的进展专家讲座第3页

维生素B12菌种选育

——原因1991年，从海底沉积物中分离出一个新厌氧型乙酸杆菌属菌株69从而产生胞内VB12试验中，乙酸杆菌产生VB12同时也产生副产物类钴啉酶，它会抑制VB12生成。依据卤代烷烃会与含钴化合物发生甲基化转移反应使钴原子发生烷基取代性质，在培养液中加入卤代烷烃便能够抑制类钴啉酶生成，从而能够提升VB12产量。所以，选育出对卤代烷烃含有抗性菌株极为关键。维生素B生产工艺的进展专家讲座第4页

维生素B12菌种选育

——方法在四氯甲烷(TCM)介质中，以甲磺酸乙酯作为诱变剂对菌株69进行诱变。结果表明，由此得到突变菌株产生VB12(7．6mg／L)是原来没有加卤代烷烃产生VB12(3．4mg／L)2．2倍。含有工业生产价值VB12产生菌，如谢氏丙酸杆菌和菲氏丙酸杆菌产生VB12可达23～25mg／L(厌气，30℃培养80～132h)。深入从各种产生菌中选择生长快、产量高谢氏丙酸杆菌和脱氮假单孢杆菌，产生VB12可达59mg／L，可作为工业生产用菌株。维生素B生产工艺的进展专家讲座第5页

提升产率其它方法为了提升VB12产率，在生物合成VB12过程中除了加入前体，如谷氨酸、苏氨酸、氨基乙酰丙酸和氨基丙醇外，还需要补充加入钴盐和5，6-二甲基苯并咪唑。甜菜碱(主要存在于糖、甜菜和糖蜜中)和胆碱对细菌产生VB12也含有刺激效果，主要是促进细胞表面对代谢产物分泌。维生素B生产工艺的进展专家讲座第6页

传统工艺一步厌氧发酵丙酸杆菌发酵VB12胞外产物丙酸、乙酸抑制细胞增加实际生产中发觉这一工艺VB12，产率并不理想，主要是因为在厌氧过程中，副产物丙酸会抑制细胞生长。显然，只有及时消除发酵体系中不停增多丙酸，才能推进生物合成应有效进行。然而，只有发酵体系处于有氧条件下，丙酸才会被分解掉。所以，当前工业生产在传统厌氧发酵上深入改进，采取二步发酵工艺。厌氧有氧分解维生素B生产工艺的进展专家讲座第7页

发酵工艺改进

二步发酵工艺膜反应器单一膜反应器与二步发酵工艺相结合膜反应器一体式膜反应器膜反应器与其它技术联用维生素B生产工艺的进展专家讲座第8页

二步发酵工艺第一步：先厌氧发酵，提升细胞生长速率第二步：好氧发酵，以分解丙酸试验证实好氧阶段溶解氧最佳浓度为1ppm，最正确通氧时间为6h。在生物合成过程中厌氧和好氧条件适时交替实施，能够充分利用二者各自优点，得到VB12浓度是纯厌氧发酵条件下所得VB12浓度2倍以上。二步发酵工艺不但提升了VB12产量，还给出发酵生产工艺新思绪，对于其它发酵体系也有一定启发和指导意义。维生素B生产工艺的进展专家讲座第9页

膜反应器这是最新发展起来一个发酵与分离耦合体系，利用分离膜优良分离性能，在反应过程中选择性地及时脱除一些产物，突破反应平衡限制或降低生化反应中这些产物对反应抑制作用，提升目标产物转化率和选择性(有膜反应器中分离膜还兼具催化反应性能)；