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包虫病样品的采集、
运送、保存和检测
达坂城区疾控中心
(一)标本的采集和保存
1、人体血清样本的采集
用真空采血管在无菌条件下采集人体静脉血液3~5ml,37℃温箱1小时后,置于4℃冰箱内3–4小时,待血块凝固,经3000rpm离心15分钟后,吸取血清置入2ml样品保存管中,封口,写明样本编号、姓名、采集地点等信息,存放于4℃冰箱内(立即检测),如不马上进行检测,则需冷冻于-20℃待检。当需要将血清送往距离较远的实验室检验时,则必须将冷冻血清用保温设备运送,否则应加硫柳汞防腐。
2、中间宿主动物棘球蚴和囊液的采集
采自屠宰场带包虫囊的绵羊等中间宿主动物病脏,用75%的酒精擦洗表面后,用带有16号针头的一次性注射器抽取囊液,减压,用无菌管收集囊液。剪开包囊取出内囊,用带有双抗的PBS冲洗,沉淀原头蚴,收集沉淀去上清,镜检。将囊液保存于-20℃、-86℃冰箱,原头蚴和内囊皮保存于-20℃、-86℃冰箱或95%的酒精中进行分子生物学检测。
3、粪便样本的采集
在粪抗原试验中,可用采粪器从犬直肠或地面上直接采取新鲜粪便样本,然后以缓冲溶液相混和,或在冰箱低温下(—86℃)冷冻一周以上进行粪抗原检测。样品避免反复冻融。
(二)标本的运送
待检样本的运输应根据国家有关规定实施。血清标本应置入含有冰袋的冷冻转运箱中进行运送;犬粪和棘球绦虫的虫体和虫卵应置于密闭、耐压、冷藏的转运箱中,专人送往实验室。
(三)标本的检测
按中华人民共和国包虫病诊断标准(WS257-2006)规定的检测方法进行检测。
1、血清学检测
(1)酶联免疫吸附试验(ELISA)
(2)间接红细胞凝集试验(IHA)
(3)PVC薄膜快速ELISA
(4)免疫印迹技术(Westernblot,WB)
(5)循环抗原检测(circulatingantigen,cAg)
(6)循环免疫复合物检测(circulatingimmunecomplex,CIC)
ByeBye
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