动物细胞培养和核移植技术讲义专家讲座.pptx

动物细胞培养和核移植技术课件邮箱：hsy09ji＠126.com密码：hy091214专题2动物细胞工程动物细胞培养和核移植技术讲义专家讲座第1页

动物细胞培养动物细胞融合生产单克隆抗体动物细胞核移植动物细胞工程惯用技术其中动物细胞培养技术是其它动物细胞工程技术基础动物细胞培养和核移植技术讲义专家讲座第2页

动物细胞培养和动物细胞培养和核移植技术讲义专家讲座第3页

动物细胞培养概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜培养基中,让这些细胞生长和增殖。动物细胞培养和核移植技术讲义专家讲座第4页

1、动物细胞培养过程动物胚胎或幼龄动物组织、器官细胞悬浮液胰蛋白酶10代细胞原代培养50代细胞传代培养细胞株无限传代细胞系单个细胞加培养液遗传物质未改变遗传物质已改变动物组织细胞间隙中含有一定量弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成含有一定弹性和韧性组织和器官。（水解弹性纤维）动物细胞培养和核移植技术讲义专家讲座第5页

1.动物细胞培养过程幼龄动物取动物器官和组织剪碎组织胰蛋白酶处理细胞培养单个细胞动物细胞培养技术是其它动物细胞工程技术基础动物细胞培养和核移植技术讲义专家讲座第6页

思索讨论：在动物细胞培养过程中，为何要用胰蛋白酶对取出动物组织进行处理？胰蛋白酶处理动物组织，能够使动物组织细胞间胶原纤维和细胞外其它成份酶解，取得单个细胞。动物细胞培养和核移植技术讲义专家讲座第7页

相关概念:原代培养：指将要培养动物细胞取出后,先用胰蛋白酶等使组织分散成单个细胞,然后配制成一定浓度细胞悬浮液，再将该悬浮液放入培养瓶中培养。传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上培养瓶中继续培养，称为传代培养。动物细胞培养和核移植技术讲义专家讲座第8页

细胞株：原代细胞普通传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞因为遗传物质改变，使其在培养条件下能够无限制传代，这种传代细胞为细胞系。细胞株和细胞系区分：细胞系遗传物质改变，含有癌细胞特点，失去接触抑制，轻易传代培养。动物细胞培养和核移植技术讲义专家讲座第9页

细胞悬浮液10代细胞50代细胞无限传代原代培养传代培养细胞株细胞系怎样界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞系？多数组织细胞必须在固定表面上生长和分裂。随细胞增多，细胞就会停顿分裂增殖遗传物质改变贴壁生长细胞分裂生长到相互接触时就停顿分裂增殖现象叫接触抑制动物细胞培养和核移植技术讲义专家讲座第10页

2.动物细胞培养条件：1、无菌、无毒环境（添加一定量抗生素，定时更换培养液）2、营养（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。）3、温度和PH36.5+（-）0.5度,7.2-7.44、气体环境：O2和CO2（95%空气和5%CO2）确保细胞顺利生长增殖动物细胞培养和核移植技术讲义专家讲座第11页

3.动物细胞培养技术应用1.蛋白质生物制品生产如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体2.健康细胞培养培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植3.细胞生理、药理、病理研究动物细胞培养和核移植技术讲义专家讲座第12页

思索：2、为何选取动物胚胎或幼龄个体器官或组织做动物细胞培养材料？1、动物细胞培养液主要成份是什么？较植物组培培养基有何独特之处？３、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？主要成份：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。独特之处有：①液体培养基②成份中有动物血清等因为这些组织或器官上细胞生命力旺盛，分裂能力强不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新动物个体动物细胞培养和核移植技术讲义专家讲座第13页

动物细胞培养液主要成份：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。与植物培养基相比其特点是：（1）液体培养基（2）含有动物血清动物体细胞大都生活在液体环境动物细胞培养和核移植技术讲义专家讲座第14页

比较项目植物组织培养动物细胞培养原理培养基性质培养基特有成份培养结果培养目标细胞全能性细胞增殖植物组织培养和动物细胞培养比较固体培养基液体培养基蔗糖植物激素葡萄糖动物血清植物体细胞株、细胞系快速繁殖、培育无病毒植株取得细胞或细胞分泌蛋白动物细胞培养和核移植技术讲义专家讲座第15页

既然动物体细胞核仍含有全能性，为何不能直接利用动物体细胞培育动物体？想一想利用动物体细胞核移植技术动物细胞全能性会伴随动物细胞分化程度提升而逐步受到限制，分化潜能逐步变弱。怎样才能使动物体