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脂肪酸甲酯化的制备

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一、主题内容与适用范围

本标准适用于所有的动植物油脂和脂肪酸。

二、目的

油脂及脂肪酸（特别是12碳以上的长碳链脂肪酸）一般不直接进行气相色谱分析，其原

因是脂肪酸脂肪酸及油脂的沸点高，高温下不稳定，易裂解，分析中易造成损失。因

此，对脂肪酸及油脂的脂肪酸组分分析时，先将脂肪酸或油脂与甲醇反映，制备脂肪酸

甲酯，降低沸点，提高稳定性，然后进行气相色谱分析。

三、BF甲酯化法

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1、仪器

（1）50ml及100ml磨口圆底烧瓶

（2）回流冷凝器（长度20～30cm，有磨口连接，与烧瓶配套）

（3）250ml分液漏斗

（4）滴管

（5）带磨口玻璃塞的试管

（6）10ml移液管

（7）沸石

2、试剂

（1）正庚烷，色谱纯

（2）轻汽油（沸程40～60℃）

（3）无水硫酸钠，分析纯

（4）0.5M的氢氧化钠甲醇溶液（不用标定），配制如下：

称取2gNaOH溶于100ml甲醇中（甲醇的含水量不得超过0.5％m/m），该溶液放置

一段时间后会出现白色沉淀，这不影响脂肪酸甲酯化制备。

（5）12～25％（m/m）BF的甲酯溶液

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批准审核编制

脂肪酸甲酯化的制备

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（6）饱和的NaCl水溶液

（7）甲基红指示剂：用60％的乙醇配置0.1％的甲基红溶液

（8）氮气：含氧量低于5mg/kg

3、操作方法，

（1）取大约350mg油样加入50ml烧杯中，移取6ml0.5M的NaOH于油样中，并加入几粒沸

石，连接回流装置，开始加热回流，回流过程中要不断摇动烧瓶。

（2）当烧瓶内的油珠消失，溶液变得透明时（大约需要5～10分钟），从冷凝器上端加7ml

BF甲醇溶液于烧杯内（用移液管移取），然后继续回流1分钟。

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（3）然后从冷凝管上端加入2～5ml正庚烷后，再回流1分钟。

（4）撤离火源，取出烧瓶，向烧瓶中加入一定量的饱和NaCl溶液，轻轻上下颠倒数次后，

静置分层。

（5）从烧杯内的上层溶液中取出约1ml转移到磨口试管中，并加入适量的无水硫酸钠，以去

除痕量的水分，得到的此甲酯化样品以备气相色谱分析用。

4、注解

（1）BF有毒，因此该试验应在通风厨中进行，同时，用后的所有玻璃仪器应立即清洗；

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（2）如果待测脂肪酸或构成油脂的脂肪酸含有2个以上的双键，建议反应的烧杯中先充氮处

理；

（3）若样品为纯脂肪酸，则试验可省去皂化，直接取一定量的脂肪酸，加入适量的BF甲醇

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溶液，煮沸2分钟，然后同上方法的3、4、5、6步骤操作；

（4）BF甲醇溶液货架期短，一般现配现用，或者置于冰箱中储藏，否则会使GLC中分析中

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出现怪峰，甚至造成多不饱和酸的损失；

（5）BF甲酯化法适用于AV2的油脂或脂肪酸；

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（6）若待测脂肪酸中不含有二十碳及二十碳