分解纤维素的微生物的分离ppt专家讲座.pptx

课题3分解纤维素微生物分离;分解纤维素的微生物的分离ppt专家讲座;课程标准

1.研究培养基对微生物选择作用。

2.探讨微生物利用。

课标解读

1.简述纤维素酶组成及作用。

2.掌握从土壤中分离某种特定微生物操作技术。;纤维素分解菌筛选;2．纤维素分解菌筛选

(1)筛选方法：法。

(2)筛选原理：刚果红能够与纤维素形成，当纤维素被分解后，刚果红——纤维素复合物就无法形成，培养基中会出现，我们能够经过来筛选纤维素分解菌。;[思维激活1]纤维素分解菌选择培养基中“选择因子”是什么？

提醒纤维素分解菌中唯一碳源是“纤维素粉”，唯有能利用纤维素微生物方可在该培养基上生存，其它微生物将因缺乏碳源而无法生存，以此，可筛选到纤维素分解菌。;1．纤维素分解菌筛选原理

即：可依据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。;2．筛选过程中包括两种培养基

(1)纤维素分解菌选择培养基

①配方：;②该培养基为液体培养基，利用液体选择培养基可增加纤维素分解菌浓度。

(2)判别纤维素分解菌培养基

①配方：;②此培养基为固体培养基——在其中加入刚果红可形成以纤维素分解菌为中心透明圈，据此可筛选到纤维素分解菌。;【巩固1】分析下面培养基配方，请回答下面问题。

纤维素分解菌选择培养基：

纤维素粉 5g

NaNO3 1g

Na2HPO4·7H2O 1.2g

KH2PO4 0.9g

MgSO4·7H2O 0.5g

KCl 0.5g

酵母膏 0.5g

水解酪素 0.5g;将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL。

(1)此培养基配方中为微生物提供碳源和氮源分别是______、______。

(2)此配方为______培养基(依据物理状态)。

(3)此培养基选择出微生物主要是_________________________。;解析该培养基唯一碳源是纤维素粉，氮源有NaNO3、酵母膏。因没有凝固剂成份，所以，该培养基从物理状态上看属于液体培养基。因该培养基仅以纤维素粉为唯一碳源，所以，可用于选择培养纤维素分解菌。

答案(1)纤维素粉NaNO3、酵??膏(2)液体(3)纤维素分解菌;

1．分离纤维素分解菌试验设计

(1)实验流程：土壤取样→(此步可省略)→梯度稀释→将样品涂布到判别培养基上→挑选产生 菌落。

(2)土壤取样

采集土样时，能够选择环境。;(3)选择培养

①目标：增加纤维素分解菌，确保能够从样品中分离到所需要。

②选择培养：称取土样20g，在无菌条件下加入装有30mL培养基锥形瓶中，将锥形瓶固定在上，在一定温度下振荡培养1～2d，直至培养液变。也可重复选择培养。;③挑选菌落

a．刚果红染色法，挑选菌落，普通即为分解纤维素菌落。

b．惯用刚果红染色法包含两种，一个是先，再加入进行反应，另一个是在时就加入刚果红。;2．课题延伸

(1)为确定得到透明圈中菌落是纤维素分解菌，需要进行 试验，纤维素酶发酵方法有和

两种。

(2)纤维素酶测定方法

普通采取 。;[思维激活2]由“选择培养”试验操作过程请你推测纤维素分解菌异化类型是需氧型还是厌氧型？

提醒由选择培养操作中“将锥形瓶置于摇床上”可推测纤维素分解菌异化类型为需氧型。;1．土壤中纤维素分解菌分离流程;2．两种刚果红染色法比较;优点;尤其提醒(1)本试验方案中应设置普通培养基(或牛肉膏蛋白胨培养基)作为对照试验。

(2)分离纤维素分解菌先经选择培养，其目标是增加纤维素分解菌浓度；然后经梯度稀释后，再涂布到判别培