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由节杆菌制备生物絮凝剂的方法

专利名称：由节杆菌制备生物絮凝剂的方法

技术领域：

本发明涉及一种水处理用絮凝剂的制备方法，具体地说是一

种利用节杆菌制备生物絮凝剂的方法。

二、技术背景现在在给水及污水处理中使用的絮凝剂有以铝

系为代表的无机高分子类，以聚丙烯酰胺为代表的合成有机

高分子类，研究表明，饮用水摄入过多的铝离子的人群中，

老年性痴呆的比例较高，聚丙烯酰胺单体具有强烈的神经毒

素和致癌作用。从甲壳素中提取的壳聚糖虽然可以作为絮凝

剂，但是生产工艺复杂，资源非常有限。微生物絮凝剂是利

用生物工程技术通过菌种发酵而生产的新型、高效水处理剂。

除具备传统化学合成絮凝剂的作用外，微生物絮凝剂还具有

无毒无害、使用安全、具有生物可降解性、生产原料易得、

可大规模生产等优点。就目前科技发展趋势看，微生物絮凝

剂具有替代化学合成同类产品的趋势。已经报导的微生物絮

凝剂产生菌涉及到细菌、放线菌、霉曲和酵母菌，发酵生产

都存在着原料成本高、发酵周期长、絮凝效率低的不足。

发明内容

本发明的目的是克服以上絮凝剂制备方法的不足，提供一

生产周期短、絮凝效率高、能够适应大规模生产及工业应用

的由节杆菌制备生物絮凝剂的方法。

四、实施方式本发明的目的是按以下方式实现的，选用节杆

菌为生物絮凝剂菌种，经发酵培养和提取制得水处理生物絮

凝剂，该生物絮凝剂的制备采用以下步骤a)菌种的制备节杆

菌(ArthrobacterSp.)LF-Tou2，由土壤采样、分离获得。选

择性的培养基重量组成(g/L)环己烷5-15(NH4)2SO42-7

K2HPO41-5KH2PO41-4MgSO40.1-0.4NaCl0.05-0.3

琼脂粉10-20pH7.0-7.4。复筛培养基的重量组成(g/L)

葡萄糖7-12(NH4)2SO42-5K2HPO41-5KH2PO41-4

MgSO40.1-0.5NaCl0.1-0.3用作固体培养时加琼脂粉10-20

pH7.0-7.4接种后培养条件为170转/分，30℃摇床培养1-2

天，测定发酵液的絮凝活性。

初选方法用选择性筛选培养基制作平板，用土壤浸液涂布接

种。30℃温箱培养1-7天，挑取生长快、透明圈大的菌落转

于固体斜面、30℃温箱培养1-3天，4℃保存。

节杆菌的生理生化特征为能消解七叶灵，还原硝酸盐，有葡

萄糖苷酶活性，能利用无机氮、柠檬酸、葡萄糖、木糖、蔗

糖、纤维二糖、果糖、半乳糖等营养成分生长繁殖。不能水

解淀粉、纤维素。

b)菌种发酵培养将节杆菌菌种按培养液总重量的1-2％的比

例接种于配有液体发酵培养基的发酵罐中搅拌发酵，发酵温

度为24-32℃，鼓入空气量为0.25-1.5L/L.分钟，pH＝

7.0-7.4，搅拌培养1-2天备用；液体发酵培养基是由以下

重量配比原料组成葡萄糖8-15份，(NH4)2SO41-5份，

K2HPO40.1-1份，KH2PO40.05-1份，MgSO40.1-1份，NaCl

0.2-1.5份，CaCl0.2-1.5份，水1000份。

c)生物絮凝剂的制备(1)发酵液通过离心机离心分离10-40

分钟，除去沉淀，取上清液备用；(2)向上清液中加入

0.05-0.15％钙离子和2.5倍体积的无水乙醇，室温静置

30-60分钟，再用离心机离心分离10-20分钟，得絮凝剂粗

品沉淀物备用；(3)沉淀物用0.5-3.0％，pH＝5-6的氯化钠

溶液溶解，用0.3-1倍沉淀物体积的十六烷基三甲基溴化铵

吸附，再经离心分离得沉淀物备用；(4)将沉淀用5-15％的氯

化钠溶解搅拌6-18小时，加入2.5-3.5倍体积的乙醇，搅

拌均匀，静置20-30分钟，离心得沉淀物，把沉淀物用无水

乙醇醇洗和真空干燥得生物絮凝剂产品。

液体发酵培养基原料组成的优选重量配比为葡萄糖10-12份，

(NH4)2SO42-3份，K2HPO40.3-0.8份，KH2PO40.1-0.6份，

MgSO40.3-0.6份，NaCl0.5-1份，CaCl0.5-1份，水1000

份。

液体发酵培养基原料组成的最佳重量配比为葡萄糖11份，

(NH4)2SO42.5份，K2HPO40.6份，KH2PO40.4份，M