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人巨细胞病毒UL149基因编码能力及编码产物结合多肽的氨基酸序列分析的开题报告
题目:人巨细胞病毒UL149基因编码能力及编码产物结合多肽的氨基酸序列分析
一、研究背景和意义
人巨细胞病毒(HCMV)是一种广泛存在于人群中的病毒,感染后可引起严重的疾病并对免疫抵抗力差的人群造成威胁。HCMV的基因组由数十个基因组成,其中UL149基因是比较新近发现的一个基因,其编码产物和其它病毒基因编码产物的生物学功能仍不清楚。
根据先前研究的报道,HCMVUL149编码产物与多种蛋白质相互作用,可能使其成为一个抗病毒的进化优势基因。因此对HCMVUL149编码产物的研究有助于揭示HCMV的生物学特征以及潜在的治疗标靶。
二、研究内容和方法
本研究的主要内容是探究HCMVUL149基因编码能力及编码产物的生物学特征,并分析其与多肽的结合性。
1.实验材料
HCMVAD169株病毒株,细胞质提取液,质粒构建合成基因。
2.实验方法
2.1HCMVUL149基因克隆和表达
利用PCR和限制性内切酶虚拟酶切技术,设计引物并构建HCMVUL149基因重组质粒;利用差错PCR修复和DNA测序技术对重组质粒进行验证。通过细胞转染技术将构建的质粒导入细胞中并表达编码产物,采集细胞提取液进行IDA-TOFMS分析。
2.2生物信息学分析
结合UniProt数据库和NCBI数据库分析HCMVUL149基因序列和编码产物的生物学特征。通过对编码产物进行密钥词检索和多序列比对,分析其功能和进化关系。
2.3蛋白质质谱分析
将HCMVUL149编码产物和多肽在适当的条件下混合,利用质谱分析技术,分析两者之间的结合情况。
三、预期结果和意义
本研究的预期结果是成功构建HCMVUL149基因重组质粒,并表达出编码产物。通过生物信息学分析和蛋白质质谱分析,可以揭示HCMVUL149编码产物与多肽的结合特性。这有助于深入了解HCMV的生物学特征以及可能的治疗标靶,为抗HCMV病毒提供新的思路和方法。
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