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烟草科学研究法

外源植物生长调节物质对烟草根中烟碱含量和烟碱合成酶活性变化

的生理效应

刘华山,韩锦峰,等植物生理学通讯第41卷第3期,2005年6月

河南农业大学农学院,郑州大学生物工程系,武汉烟草(集团)有限公司

1研究目的:实验从烟草中合成烟碱的酶活性、烟碱含量与叶面喷施外源生长

调节物质之间的关系方面进行了探讨,以期能为抑制或减少烟叶中烟碱的积累,提高

烟叶品质和可用性提供参考。

2研究方法:实验材料为烟草品种K326,烟苗长至60d时打顶,并进行如下处

理:不打顶不加生长调节物质,打顶不加生长调节物质,打顶喷施20mg/LIAA、5

mg/LABA、5mg/L6-BA和30mg/LGA3。于处理后1、10、20、30d时测定根系

内3种酶(ODC、PMT、MPO)活性及烟碱含量,取烟株自下而上第12片叶测定烟碱含

量。

3主要结果:打顶能显著提高根中与烟碱合成有关的3种关键酶的活性,打顶

的比不打顶的烟草根中鸟氨酸脱羧酶(ODC)、腐胺-N-甲基转移酶(PMT)和N-甲基腐

胺氧化酶(MPO)活性升高,烟叶中烟碱含量剧增;打顶喷施ABA和6-BA烟叶中烟碱含

量升高,喷施IAA和GA的下降,IAA的效果更明显。

4评价:本试验设计对比鲜明,数据很具体详细,让读者很容易看出和比较出不

同,从而得出相应的结论。但喷施的生长调节物质没有设置其他的浓度梯度,试验中

所设计的浓度梯度太少。并且酶的活性易受外界条件(如温度、湿度等)的影响,若

换成测定三种酶的基因表达量结果会更准确。

茉莉酸处理烤烟打顶诱导烟碱合成调控相关蛋白质的筛选

王茂,刘卫群等烟草科技2007,28(1):21-24

河南农业大学烟草学院,河南农业大学生命科学学院

1研究目的:为研究特异蛋白质对烟碱生物合成调控的分子机制,探索打顶促

进烟株体内烟碱合成的调控机制以及茉莉酸(JA)信号途径在其中的作用,用JA处理

模拟烟草打顶,采用差异蛋白质组学技术对烤烟根尖组织细胞蛋白质组进行分析鉴

定了一些差异蛋白质点。

2研究方法:烟草品种为K326,移栽后60d时打顶及茉莉酸处理,不打顶作为

对照。处理24h后于根尖组织

3cm提取蛋白质,3次重复。用双向凝胶电泳定量定性分析根尖组织蛋白质样

品,包括斑点检测、斑点匹配、数据分析和输出。分别筛选明显差异、3次重复稳

定的蛋白质斑点进行2-DE/MS肽指纹图谱分析,2-DE/MS肽指纹图谱使用Mascot

软件搜索NCBInr数据库的GreenPlants。

3主要结果:2-DE图谱经ImageMaster2DPlatinum软件识别结果显示,约有

500个蛋白质点被清楚分离。通过比较发现,打顶和JA处理后表达上调的蛋白质分

别有13和26个,其中有3个共同蛋白质点;表达下调的分别有5和6个,其中有3

个共同蛋白质点;特异表达点分别有8和5个,其中有4个共同蛋白质点。将其中8

个差异点采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱进行了肽质量指纹图谱分析鉴

定。其中4个蛋白质点在JA处理和打顶处理中的变化是相同的,表明这些蛋白质点

可能受到茉莉酸信号途径的调控,同时又是刺激烟碱合成的重要因子。

4评价:差异蛋白质组学是近年来新发展的生物科学技术,而烟碱的生物合成

调

控过程是非常复杂的,通过茉莉酸处理模拟打顶,筛选出了几种与烟碱合成密

切相关的蛋白质点,本研究有助于探索打顶促进烟碱生物合成调控的分子机制,但关

于蛋白质在调控烟碱生物合成过程中的具体作用仍没有阐明,需进一步的研究。

喷施外源植物生长调节物质对白肋烟烟碱含量及其合成关键酶活性

的影响

梁思威杨锦鹏,等华中农业大学学报2013年9月第32卷第5期

华中农业大学微量元素研究中心,北省烟草科研所

1研究目的:采用盆栽试验,研究白肋烟打顶后喷施外源植物生长调节物质

YCL2和Z5对烟碱含量及其合成关键酶(鸟氨酸脱羧酶和精氨酸脱羧酶)的活性以及

总氮、总糖、氯和钾含量的影响为YCL2和Z5的推广应用提供理论依据。

2研究方法:试验于2010年在湖北省恩施土家