生命的奥秘基因治疗专家讲座.pptxVIP

生命奥秘

AJourneyintoLife

;基因治疗;基因治疗基本概念

基因治疗发展历程

基因治疗策略

基因治疗流程

基因治疗应用;约3万个基因;“bubbleboy”;基因治疗案例分析成功案例;SCID患者;ADA缺失;ADA缺点→

→脱氧腺嘌呤核苷酸代谢受阻

→dATP↑ATP↑

→抑制核糖核苷还原酶活性

→阻止DNA复制和修复→T、B淋巴细胞增殖障碍。;;年AshantiDeSilva

21岁，仍生存良好;策略：将淋巴细胞ADA酶恢复至正常5-10%，

维持免疫系统功效，改进病人症状。;为何选择ADA缺点症？;一、基因治疗基本概念;基因治疗基本标准;生殖细胞(germline)基因治疗;二、基因治疗发展历程;1980年，人β地中海贫血患者基因治疗，没取得好疗效，也无不良反应。

1989年，首个获批基因治疗，

将细菌新霉素抗性基因neoR

导入肿瘤浸润淋巴细胞，

回输患者体内，

细胞存活了两个月。;2.狂热期：1990年-1995年;法国巴黎奈克儿童医院费舍尔博士与卡波博士也对两例先天性免疫功效不全患儿成功地进行了基因治疗。;中国第一例基因治疗;3.理性期：1996年-至今;载体安全性;Wilson;第三代腺病毒相关表示载体;世界首个上市基因治疗产品;;基因治疗现实状况;疾病种类;年9月16日3654例基因治疗临床试验;三、基因治疗策略;1.基因置换;基因置换;2.基因添加;将“自杀”基因导入靶细胞

基因表示酶能使药品前体转化为细胞毒性代谢物，杀死靶细胞;导入自杀基因;抑制某个基因表示，或者经过破坏某个基因而使之不表示，以到达治疗疾病目标。;基因缄默技术;反义寡聚核苷酸（?类）

与mRNA特异性结合，阻断翻译过程;四、基因治疗流程;1.选择治疗基因;易取和移植。血细胞、肌细胞；

寿命长；

易受外源基因转化；

转染细胞培养后回输，易成活。;当前惯用靶细胞

造血细胞

皮肤成纤维细胞

肝细胞

血管内皮细胞

淋巴细胞

肌肉细胞

肿瘤细胞;3.载体选择;;酶切后目标基因片段;;;;基因克隆基本步骤;病毒介导基因转移系统;逆转录病毒生活史;RNA去向;;env,pol,gag为活病毒所需基因

载体构建时剔除，只保留Ψ包装信号;包装细胞需稳定表示病毒结构蛋白;LTR;4.将目标基因导入;脂质体介导基因转移示意图;基因治疗路径;基因治疗两种路径;5.靶细胞回输;基因治疗应用;

;腺苷脱氨酶(ADA)和嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)缺乏症

珠蛋白生成障碍性贫血和血红蛋白病

血友病和其它血浆蛋白缺乏症

苯丙酮酸尿症和其它先天性代谢缺点病

莱-纳(Lesch-Nyhan)综合征

家族性高胆固醇血症

囊性纤维化病;年11月3日，

欧盟同意首个基因治疗药品Glybera

脂蛋白脂肪酶缺乏症（发病率～1/100万）。

接收一次治疗后，可显著降低致死性急性胰腺炎发病率。

荷兰UniQure研制，

花费将高达125万欧元。;，11月6日，

FDA同意SparkTherapeutics基因治疗产品SPK-RPE65。

利伯氏黑蒙症（Leber’scongenitalamaurosis）RPE65基因突变致视网膜营养不良致盲。

21病人能够对感觉到光，

几位经三年治疗已复明。

治疗费用$100,000/位。;视网膜退化小鼠模型里。

将视紫红质光敏蛋白表示在双极细胞中。

利用双极细胞来看到外面世界。;，9月10号，

FDA经过了血友病B型（缺乏凝血因子IX）;肿瘤是一类多步骤、多基因突变疾病，这些基因主要是编码调控细胞周期各种蛋白因子基因。;导入抑癌基因

抑制过分表示癌基因

导入免疫增强基因(细胞因子、共刺激分子)

导入抑制血管生成基因(endostatin等)

导入自杀基因;p53——基因组卫士;RNAi

作用机制;肿瘤相关基因调控网络;microRNA(miRNA)是一组由基因组编码长度约20～23个核苷酸非编码RNA，经过和靶基因mRNA碱基配对引导缄默复合体(RISC)降解mRNA或妨碍其翻译。;miRNA生物合成;miRNAsAff