抗菌肽PR39靶向巨噬细胞表达抗胞内菌感染研究的开题报告.docxVIP

抗菌肽PR39靶向巨噬细胞表达抗胞内菌感染研究的开题报告

一、研究背景和意义

抗菌肽是源于天然的抗菌分子，具有广谱的抗菌活性和抗生理因素等多种特性，成为了目前研究的热点。其中PR39是一种富含精氨酸的抗菌肽，在体内能够发挥重要的免疫调节作用，并且具有良好的细胞膜透过性，可作为一种有效的新型抗菌药物。然而，对于各种感染的机体内部，仅有细胞外部位的抗菌肽很难起到治疗作用，而PR39则有巨噬细胞表达，既可以抑制宿主的炎症反应，又可以直接杀死靶菌，成为了一种优秀的内源性抗菌肽。

因此，本研究旨在通过构建含有PR39的载体，将其转染至巨噬细胞中，探究PR39作为内源性抗菌肽的抑菌机理，以及在巨噬细胞表达状态下对于细胞内部的菌感染的治疗效果，为PR39的应用提供新的理论支持。

二、研究内容和方法

1.建立PR39表达质粒

将PR39基因克隆至启动子为CMV的表达载体上，经过DNA测序鉴定，筛选出目标序列正确的PR39表达质粒。

2.转染PR39表达质粒至巨噬细胞中

采用给予pLenti-CMV-PR39-GFP和pLenti-CMV-GFP质粒的Lipofectamine2000转染至RAW264.7细胞中，根据共荧光显微镜及Westernblot结果分别筛选出表达PR39的细胞株，建立PR39表达的RAW264.7细胞株。

3.巨噬细胞内细菌感染模型的建立

采用溶链法制备巨噬细胞内