仪器分析色谱导论.ppt

第四章色谱分析法导论;1906年，俄国植物学家茨维特在别离植物叶子中的色素时，将叶片的石油醚〔饱和烃混合物〕提取液倒入一根装有CaCO3粉末的竖直玻璃管中，再参加纯的石油醚任其自然流下，一会儿柱中出现不同颜色的谱带，植物浸取液中的色素得到了别离。;色谱法中包含两相

固定相—固定不动的相CaCO3

流动相—推动混合物流动的液体石油醚;1、按两相状态分类;2、按操作形式分类

〔1〕柱色谱：固定相装在柱管内的色谱法。

〔2〕纸色谱：滤纸为固定相的色谱法，流动相是含一定比例水的有机溶剂，样品在滤纸上展开进行别离。

〔3〕薄层色谱：把固体固定相压成或涂成薄膜的色谱法。;3、按别离原理分类

〔1〕吸附色谱：利用吸附剂外表对被别离的各组分吸附能力不同进行别离。

〔2〕分配色谱：利用固定液对各组分的溶解能力不同进行别离。

〔3〕离子交换色谱：利用离子交换剂对各组分的亲和力不同进行别离。

〔4〕凝胶色谱：利用凝胶对分子的大小和形状不同的组分所产生的阻碍作用不同而进行别离的色谱法。;§4-2色谱图及色谱常用术语;1、基线—在实验操作条件下，色谱柱后没有样品组分流出的曲线称为基线。稳定的基线应该是一条水平直线。

2、峰高—色谱峰顶点与基线之间的垂直距离，以〔h〕表示。峰上下与组分浓度有关，峰越高越窄越好。

;

标准偏差σ—峰高0.607倍处的色谱峰宽的一半。

半峰宽Y1/2—峰高一半处对应的峰宽。

Y1/2=2.354σ

基线宽度Y—色谱峰两侧拐点所作切线在基线上的距离。

Y=4σ

4、色谱峰面积A—色谱峰与峰底所围的面积。;〔1〕死时间t0——不被固定相吸附或溶解的组分流经色谱柱所需的时间。

〔2〕保存时间tR——组分流经色谱柱时所需时间。

〔3〕调整保存时间t?R——扣除了死时间的保存时间。

t?R=tR-t0

**t?R表达的是组分在柱中被吸附或溶解的时间，更合理的反映了被测组分的保存特性。;〔5〕死体积V0——指色谱柱在填充后，柱管内固定相颗粒间所剩留的空间、色谱仪中管路和连接头间的空间以及检测器的空间???总和。当后两相很小可忽略不计时，死体积就是色谱柱中的所有空隙的总体积。死体积与死时间关系：

V0=t0F0

式中，F0为柱后出口处流动相的体积流速。

;〔6〕保存体积VR——指从进样开始到被测组分在柱后出现浓度极大值时所通过的流动相体积。

VR=tRF0

〔7〕调整保存体积V?R——扣除了死体积的保存体积。

V?R=VR?V0=t?RF0

〔8〕相对保存值——在相同操作条件下，组分2对另一参比组分1调整保存值之比。;色谱流出曲线的意义：;;

分配比也是由组分、固定相和流动相的热力学性质决定的。它不仅随柱温、柱压变化而变化，而且还与流动相及固定相的体积有关。

分配比越大，说明组分在固定相中的量越多，相当于柱的容量大，因此又称容量比或容量因子。它是衡量色谱柱对被别离组分保存能力的重要参数。;§4-3色谱法的根本理论;

在50年代，色谱技术开展的初期，Martin等人把色谱别离过程比作分馏过程，并把分馏中的半经验理论－塔板理论用于色谱分析法。

塔板理论把色谱柱比作一个分馏塔，塔内有假设干个想象的塔板，物质在每个塔板里的两相之间到达一次分配平衡。经过屡次这样的分配之后，最后，挥发度大的组分和挥发度小的组分彼此别离，挥发度大的最先从塔顶〔即柱后〕逸出。显然这个理论并不完全符合色谱柱的实际别离过程，色谱别离和一般的分馏塔别离有着重大的差异，但是因为这个比喻形象简明，能说明一些问题，因此几十年来一直沿用。

;塔板理论的假设：

在每一个平衡过程间隔内，平衡可以迅速到达；

将载气看作成脉动〔间歇〕过程；

试样沿色谱柱方向的扩散可忽略；

每次分配的分配系数相同。;塔板理论是一种半经验性理论。它用热力学的观点定量说明了溶质在色谱柱中移动的速率，解释了流出曲线的形状，并提出了计算和评价柱效上下的参数,有一定的开创性。但是，色谱过程不仅受热力学因素的影响，还与分子的扩散、传质等动力学因素有关，塔板理论只能定性地给出板高的概念，却不能解释板高受哪些因素影响；也不能说明为什么在不同的流速下，可以测得不同的理论塔板数，因而限制了它的应用。;1956年荷兰学者vanDeemter〔范第姆特〕等在研究气液色谱时，提出了色谱过程动力学理论——速率理论。他们吸收了塔板理论中板高的概念，并充分考