SCT7226-2017 鲑甲病毒感染诊断规程.pdfVIP

ICS65.020.30

B41

卡：才－

中华人民共和国水产行业标准

SC/T7226-2017

蛙甲病毒感染诊断规程

Diagnosticprotocolforsalmonidalphavirus

2017-06-12发布2017-10-01实施

～中华人民共和国农业部发布

SC/T7226-2017

...a..L..‘-

目。吕

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本标准由农业部渔业渔政管理局提出。

本标准由全国水产标准化技术委员会（SAC/TC156）归口。

本标准起草单位：东北农业大学、全国水产技术推广总站、中国检验检疫科学研究院、北京出入境检

验检疫局。

本标准主要起草人：刘敏、余卫忠、吕永辉、江育林、张利峰、任彤。

I

SC/T7226-2017

蛙甲病毒感染诊断规程

1范围

本标准给出了蛙甲病毒感染的临床症状检查，规定了样品采集及处理、病毒分离、病毒鉴定及结果

的综合判定的方法。

本标准适用于蛙甲病毒感染蛙示

监测。

2规范性引用文件

下列文件对于它

件。凡是不注日期

3缩略语

CPE:

4.1

4.2

4.3CHSE-214细胞。

4.4Trizol试剂，4℃保存。

4.5MMLV反转录酶（ZOOU），一20

4.6DNA分子量标准：DLZOOO。

4.7澳化乙链。

4.8琼脂糖：电泳级。

4.9dNTP:10mmol/L，一20℃保存。

4.10TaqDNA聚合酶：5U/µL，一20℃保存。

4.11RNA酶抑制剂（40U/µL），一20℃保存。

4.12TBE电泳缓冲液（5倍浓缩液）：配方按附录A中A.1的规定执行。

4.13引物：用TE缓冲液或无菌去离子水配置成10µmol/L,20℃保存；扩增大小为516忡。引物序

SC/T7226-2017

列如下：

EZF:5-CCGTTGCGG-CCACAC-TGGATG-3

EZR:5CCT-CAT-AGGTGATCGACG-GCAG-3

4.14磷酸盐缓冲液（PB曰：0.01mol/L，配方按附录A.2的规定执行。

4.15L…15或EMEM细胞培养液。

4.16胎牛血清。

4.17元水乙醇：分析纯。

4.18普通琼脂糖凝胶DNA电泳6倍上样缓冲液。

5仪器和设备

5.1高速冷冻离心机：4·c转速12000g以上。

5.220℃冰箱。

5.3PCR仪。

5.4核酸电泳仪和水平电泳槽：输出直流电压OV~600V。

5.5凝胶成像仪。

5.6可控温水浴锅或恒温金属浴。

5.7微波炉。

5.8生化培养箱。