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分光光度法原理介绍
酶抑制率法(分光光度法);吸光光度法:基于物质对光选择性吸收而建立分析方法,包含目测比色法和分光光度法。
不一样物质因为结构不一样,所吸收光波长及吸收程度不一样,这就是物质对光选择性吸收
;当一束强度为I0平行单色光经过一均匀吸收介质时,因为吸光物质分子与光子作用,一部分光子被吸收,一部分光子透过介质。设透过光强度为It,则透光率T定义为T=It/I0,而－lgT称为吸光度A,即
Ａ＝－lgT=lgI0/It?;测量某物质对不一样波长单色光吸收程度,以波长（?）为横坐标,吸光度（A）为纵坐标,绘制吸光度随波长改变可得一曲线,此曲线即为吸收光谱。
不一样浓度同一物质,它最大吸收波长是不变,但吸光度随浓度增大而增大。
在最大吸收波优点测量吸光度,其灵敏度最高。;有色溶液对某一波长光吸收强度与有色物质浓度c及吸光溶液液层厚度b成正比,称为光吸收定律或朗伯－比尔定律,其数学表示式为
A=εbc;;
;
;试剂
pH8.0缓冲溶液分别取11.9g无水磷酸氢二钾与３.２g磷酸二氢钾,用1000mL蒸馏水溶解。
显色剂分别取160mg二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）和15.6mg碳酸氢钠,用20mL缓冲溶液溶解,4℃冰箱中保留。
;试剂
底物:取25.0mg硫代乙酰胆碱，加3.0mL蒸馏水溶解，摇匀后置4℃冰箱中保留备用。
乙酰胆碱酯酶依据酶活性情况，用缓冲溶液溶解，3min吸光度改变ΔA0值应控制在0.3以上。摇匀后置4℃冰箱中保留备用。;分析步骤;结果计算;结果判定;酶抑制率法对部分农药检出限;说明;THANKYOU
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