人教版高中生物一轮复习PPT 第58讲 PCR技术拓展应用.pptx

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第58讲人教版高中生物一轮复习

本节课是PCR内容的拓展课,设计PCR定点突变技术、反向PCR、荧光定量PCR等练习中热门考点,但是这些内容往往是老师不好讲授,主要原因还是过程比较复杂,所以为了老师讲授方便与学生理解,我将这些过程详细的绘制出来,并加以适当动画!并进行比较总结,效果比自己用笔画出来好多了!具体内容详见PPT!

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重叠延伸PCR大引物PCR现在能看懂了吗?PCR定点突变技术

重叠延伸PCR

典例分析_________________________________________________________学号点名典例1.利用重叠延伸PCR技术进行定点突变可以实现对纤维素酶基因进行合理性改造,其过程如下图所示。下列分析不正确的是(???)A.PCR1过程中的产物AB是依赖引物a和引物b扩增的结果

B.引物c和引物b上均含有与模板链不能互补的碱基

C.①过程需要先加热至90℃以上后再冷却至50℃左右

D.②过程需要利用引物a和引物d获得突变产物ADD

典例分析_________________________________________________________学号点名2.(2023·辽宁大连模拟)通过引物设计,运用PCR技术可以实现目的基因的定点诱变,如图为基因工程中获取突变基因的过程,其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对,但不影响引物与模板链的整体配对,反应体系中引物1和引物2分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位点。有关叙述正确的是()

典例分析_________________________________________________________学号点名有关叙述正确的是()A.限制酶a和限制酶b的识别位点分别加在引物1和引物2的3′端B.PCR反应体系中需要加入脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶、Ca2+等C.第2轮PCR中,引物1与图中②结合并形成两条链等长的突变基因D.在第3轮PCR结束后,含突变碱基对且两条链等长的DNA占1/4D解析:DNA的合成方向是从子链的5′端向3′端延伸,据此可知,图中限制酶a和限制酶b的识别位点分别加在引物1和引物2的5′端,A错误;PCR反应体系中需要加入脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶和扩增缓冲液(含Mg2+)等物质,B错误;第2轮PCR中,引物1与图中②结合形成两条链不等长的突变基因,C错误;在第3轮PCR结束后

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