纯化系统专题知识专家讲座.ppt

纯化系统（AutoPurificationSystem）纯化系统专题知识专家讲座第1页

制备色谱介绍2纯化系统专题知识专家讲座第2页

一、色谱发展和制备色谱分类二、制备色谱基本理论三、制备型高效液相色谱四、Waters纯化系统操作规程五、应用实例3纯化系统专题知识专家讲座第3页

一、色谱发展和制备色谱分类4纯化系统专题知识专家讲座第4页

1980s1960s1950s1903色谱发展史1938茨维特,一个新型吸附现象及其在生化分析中应用Kuhn和Lederer从维生素B中分离出B6取得了1938年诺贝尔化学奖。1940s1941年,Martin和Synge提出液液分配色谱法,塔板理论1942年,Martin等发展了纸色谱1952年,Martin和James提出气液分配色谱法,诺贝尔奖1956年,VanDeemter色谱速率理论,用于气相色谱1958年,Golay提出毛细管柱气相色谱1962年,Klesper提出超临界流体色谱1963年,Giddings奠定了当代液相色谱理论基础60年代中后期,逆流色谱,凝胶渗透色谱,亲和色谱1969年,当代液相色谱受到重视高速逆流色谱出现毛细管电泳发展s超高效液相色谱多维分离联用技术5纯化系统专题知识专家讲座第5页

模拟移动床色谱高速逆流色谱高压制备色谱低压及中压制备色谱经典柱色谱制备薄层色谱制备色谱分类吸附柱色谱离子交换色谱凝胶柱色谱亲和柱色谱干柱色谱分配柱色谱低压:0.5Mpa中压:0.5-2Mpa固定相不需要载体制备型分离重点两相溶剂系统选择石油工业和糖工业尤适合用于两组分混合物分离6纯化系统专题知识专家讲座第6页

二、制备色谱基础理论7纯化系统专题知识专家讲座第7页

分析和制备有什么异同？制备方法中关注参数有哪些？怎样选择制备柱尺寸？怎样做到分析到制备线性放大？制备中难点有哪些？8纯化系统专题知识专家讲座第8页

分析制备目标尽可能多取得样品组成信息尽可能短时间内取得尽可能多纯组分或化合物对象大部分或者全部样品组分通常只对一个或几个样品组分感兴趣进样量仅够检测用即可尽可能加大进样量柱内径1-5mm5mm-500mm填料粒径流速溶解度通常不主要非常主要9纯化系统专题知识专家讲座第9页

色谱基本理论及相关参数两大理论:塔板理论:说明了色谱、蒸馏和萃取之间相同性，将色谱柱构想成由许多液液萃取单元或理论塔板组成；相同于精馏过程，色谱分离也是一个分配平衡过程.N=16(tR/wb)2

N=5.54(tR/w1/2)2速率理论:研究各种动力学原因对峰展宽影响。H=A+B/u+Cu10纯化系统专题知识专家讲座第10页

相关参数分离度（分辨率）:在色谱分离过程中表示两组分相互分离程度，普通情况下，分离度大于1.5时称为完全分离11只有峰窄而间距大分离度是令人满意。在色谱分析中要求:两组分保留值差异要足够大两色谱峰要足够窄待测组分分离度要足够大，分离过程要尽可能短纯化系统专题知识专家讲座第11页

相关参数理论塔板数(N):描述色谱峰谱带展宽程度，是物理原因,N=16(tR/W)2选择因子(α):描述两个被分离组份分离好坏程度，是化学原因,α=tR2/tR1容量因子(k):表示了被分离组分与柱填料之间作用强弱,k=(tR-t0)/t012纯化系统专题知识专家讲座第12页

分离因子,柱效,容量因子对分离影响相关参数13纯化系统专题知识专家讲座第13页

上样量(Capacity):纯化过程中,目标物质上样量。能够是体积也能够是质量。回收率(Recovery):产品珍贵时此项很主要。流动相条件、环境会影响它。分离度(Resolution):在纯化最终阶段,此项很关键,尤其是杂质结构和目标物结构相同时。14相关参数纯化系统专题知识专家讲座第14页

HPLC柱内径/mm柱长/cm填料粒径/μm处理量/次分析4-525-505几十到几百μg半制备8-1025-505-105-50mg制备20-2225-505-200.1-1g大制备20g/d15制备规模纯化系统专题知识专家讲座第15页

16确定样品信息开发分析级分离方法增加进样量放大为制备级方法测定纯度分析放大到制备纯化系统专题知识专家讲座第16页

17分析放大到制备—确定样品信息样品性质组成、基体、复杂性、性质、相态、浓度、价值产品纯度微量天然产物,70%核磁或者红外测试样品,95%以上定量分析用标准品,99%以上纯化系统专题知识专家讲座第17页

18分析放大到制备—开发分析级分离方法良好分离选择性α足够柱效N适当溶剂强度:容量因子k纯