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化妆品中16a-羟基泼尼松龙的测定

(BJH202203)

1范围

本方法规定了化妆品中16a-羟基泼尼松龙的定性和定量测定方法。

本方法适用于膏霜乳类、液体(水)类化妆品中16。-羟基泼尼松龙的定性和定量测定。

2原理

样品经50%乙懵超声提取，采用高效液相色谱仪分离，质谱检测器检测。根据保留时间和特征离子对的相对丰度比定性，定量离子对峰面积定量，以标准曲线法计算含量。

3试剂和材料

除另有规定外，本方法中所用试剂均为分析纯及以上规格，水为符合GB/T6682规定的一级水。

1乙睛,色谱纯。

3.250%乙月青：取乙月青(3.1)、水按体积比1:1混合，摇匀。

3标准品：16a-羟基泼尼松龙(16alpha-hydroxyprednisolone)标准品，纯度298%。标准品的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量、结构式详见附录A中的表A.Io

416a-羟基泼尼松龙标准储备溶液：称取16a-羟基泼尼松龙标准品10mg(精确到0.00001g),置于10mL容量瓶中，用乙晴(3.1)溶解并定容至刻度，摇匀。该标准储备溶液的质量浓度为1000mg/Lo置于-18℃冰箱中保存。

516a-羟基泼尼松龙标准溶液：精密移取16a-羟基泼尼松龙标准储备溶液(3.4)1.0mL,置于100mL容量瓶中，用乙睛(3.1)定容至刻度，摇匀。该标准溶液的质量浓度为10mg/L。

4仪器和设备

高效液相色谱-二重四极杆质谱联用仪。

分析天平：感量0.0001g和0.00001g。

超声波清洗器。

涡旋混合仪。

5高速离心机。

样品应按照标签标示的贮存条件进行保存。取样前，应检查封口的完整性，观察样品的性状和特征，并使样品混匀。打开包装后，应尽可能快地取出所要测定部分进行分析?，取样后，应将样品进行密封保存。

6分析步骤

空白基质提取液

称取空白试样0.2g（精确到0.0001g）,置于10mL具塞比色管中，自“加入50%乙月青约9矶”起与样品同法处理（6.4）,作为空白基质提取液。空白样品的性状应与待测化妆品尽量基本一致。

基质标准中间液

精密量取16cl-羟基泼尼松龙标准溶液（3.5）0.1mL,置于10mL容量瓶中，用空白基质提取液（6.1）稀释至刻度，摇匀，制成16a-羟基泼尼松龙浓度为100ug/L的基质标准中间液。基质标准中间液现用现配。

基质标准系列溶液

精密量取基质标准中间液（6.2）适量，用空白基质提取液（6.1）配制浓度为0.5、1、2、5、10ug/L基质标准系列溶液。基质标准系列溶液现用现配。

样品处理

称取样品0.2g（精确到0.0001g）,置于10mL具塞比色管中，加入50%乙取（3.2）约9mL,涡旋振荡，使试样与提取溶剂充分混匀。超声提取lOmin,静置至室温，用50%乙月青定容至刻度，摇匀，以10000r/min转速离心lOmin,取上清液经0.22um有机滤膜过滤，滤液作为供试品溶液备用（供试品溶液可根据实际浓度进行适当稀释）。

仪器参考条件

色谱条件

色谱柱：38柱（100mmX2.1mm,2.7Um）,或等效色谱柱；

流动相：A为水，B为乙盾（3.Do梯度洗脱程序见表1；

流速：0.3mL/min；

柱温：30℃；

进样量：5uLo

表1梯度洗脱程序

时间(min)

流动相A(%) 流动相B(%)

0.00

95 5

1.00

95 5

10.00

5 95

13.00

5 95

13.10

95 5

15.00

95 5

质谱条件

离子源：电喷雾离子源(ESI源)；

监测模式：负离子多反应监测模式(MRM),监测离子对及相关参数设定见表2。

表216a-羟基泼尼松龙监测离子对及相关参数设定

TOC\o1-5\h\z母离子 子离子 CE

组分名称

(m/z) Qn/z) (eV)

*427A —9Q

16a-羟基泼尼松龙 375.4 ：

283.2 -36

*为推荐的定量离子。

注：当采用不同质谱仪器时，仪器参数可能存在差异，测定前应将质谱参数优化到最佳。

定性判定

取供试品溶液(6.4)与标准溶液在相同分析条件下测定，样品中如呈现定量离子对和定性离子对的色谱峰，被测成分的特征离子峰保留时间与标准溶液对应的保留时间一致，且选择的监测离子对的相对丰度比与相当浓度的标准溶液的监测离子对的相对丰度比的最大偏差不超过表3的规定，则可以判定样品中存在对应的组分。

表3定性确证时相对离子丰度比的最大允许偏差

相对离子丰度(k)

k50%

50%Nk20%

20%^k10%

kWIO%

允许的最大偏差

±20%

±25%

±30%

±50%