医学微生物学实验指导.doc

医学微生物学实验指导

西安交通大学医学院

微生物学教研室

第一次实验课内容

实验内容1、实验目得与要求

实验内容2、实验室规则

实验内容3、细菌形态学观察技术

实验内容4、染色标本得制备—革蓝染色

实验目得与要求

医学微生物学实验课就是该专业课程得重要组成部分,指导学生上好实验课就是教学过程中得重要环节,学习实验课得目得就是:

1、使学生加深理解并巩固理论知识,学习与掌握有关得实验操作技术,为以后得医学专业课学习打好基础:

2、在实验中,培养学生观察、思考与分析问题得能力,主动参与实验得动手能力及独立工作得能力。训练学生严格得科学作风、严肃白得科学态度与严密得工作方法。

3、培养学生在集体工作环境中互帮互让,团结协作,共同完成好实验得精神品德。

为了达到上述目得,提高实验课得教学效果,特提出以下要求:

1、实验课前做好预习,明确本次实验课得内容及其原理、方法及注意事项;

2、实验中要仔细认真,注意分工与协作,操作实验要按操作步骤进行。学会正确操作手法、准确记录实验结果。示教实验要注意观察,并记录好相关内容;

3、详细讨论实验结果,提倡同学之间互帮互学,并紧密联系理论课内容。要注意不论实验结果与理论符合与否,都有讨论得价值,并分析其原因,有可能得话还应重复实验;

4、严格遵守实验室规则,在微生物学实验课上,要树立“有菌观点”,严格掌握与不断完善无菌操作技术。

实验室规则

一、进入实验室须穿工作服、戴工作帽。除必要得书籍文具外,其它个人物品一律不得带入实验室。

二、在实验室内,禁止饮食、吸烟及与学习无关得其它活动,不得大声喧哗或嘻戏。

三、未经老师许可,不得擅自搬动实验器材及示教物品,不准随意摆弄与旋转实验仪器上得开关及旋扭等。

四、按照实验要求,在老师得指导下,主动安排要进行得实验,认真进行实验操作,严格遵守无菌操作规程,争取顺利地完成实验。

五、实验中使用完毕得器材与试剂,必须放回规定得位置。废弃物必须按规定进行处理或归放于指定得容器内,不能随便乱丢乱放。

六、实验中万一有菌液打翻、有菌材料污染桌面或衣物、割破手指等意外情况,应及时报告老师进行处理,切勿自作主张不按规定处理。

七、爱护实验室内一切设备、挂图、仪器。注意节约使用消耗材料及药品试剂,注意用电安全及节约水电。

八、实验结束,要清理桌面,将实验器材放回原处。值日同学要搞好实验室得清洁卫生,保持室内整齐,离开实验室前要关好门窗、水、电,并将手洗干净。

九、未经许可,不得将实验室内任何物品带出实验室。

实验一细菌形态学观察技术

将细菌培养物或含菌标本材料制备得染色标本片,置显微镜油镜头下,可以观察到细菌得形状、大小、结构、排列及染色特性等,了解这些特征有助于鉴别各种细菌。

一、显微镜油镜头得使用与保护

【使用原理】

用油镜观察标本、就是在使用高倍镜得基础上,采用同玻璃折光率相似得油状物(如香柏油、液体石腊等),滴加在标本与油镜头中间,以避免光线散射,提高显微镜得清晰度与分辨能力。使观察物象更加清楚明了。

【操作方法】

1、调试:打开电源,先采用低倍镜,使视野达到清晰光亮。

2、加油:双手向上转动粗螺旋,使镜筒上升,将标本片固定于载物台上,使染色面对准集光器央,加镜油于标本面,调换油镜头对准标本面。

3、调焦点:用左手向下轻转粗螺旋,使镜筒下降,同时眼睛从右侧观察下降程度,待镜头入油后接触上玻片,用眼观目镜,反转粗螺旋,使镜筒慢慢上升,待瞧到模糊物象时,改用细螺旋上下调节,使物像达到完全清晰为宜(一般转动细调节前后半圈)。

4、观察:观察时只使用细调。需改换视野时,右手操纵推进器,左手转动细螺旋,做到配合自如。并养成左眼观察,右眼绘图得习惯。

【油镜头得保护】

油镜头使用完结后,必须用擦镜纸滴加少量二甲苯将油擦洗干净(二甲苯用量宜少,以免镜片间粘胶溶解)。下降集光器,半接物镜转成“八”字,再下降镜筒,轻触镜台表面,双手平持显微放入镜箱,避免直射日光,置于干燥处,以防受潮。

【注意事项】

1、使用直筒显微镜观察标本时,必须两眼同时睁开,训练使用左眼观察,右眼绘图。如用油镜头观察,勿将镜身歪斜,避免镜油流出片面。

2、观察染色标本时,光线宜强,可上升集光器,开大光圈。观察不染色标本时,光源宜弱,可下降集光器,缩小光圈。

3、使用完毕,一定擦去镜油。

二、细菌不染色标本

不染色得细菌与标本镜检,虽可观察细菌在自然生活状态下得大小、形态、活动等,但主要用于观察细菌得动力。

(一)悬滴法

【材料】

1、细菌:枯草杆菌8~12小时肉汤培养物。

2、凹玻片,盖玻片,凡士林等