《膜片钳与ltp》课件.pptVIP

膜片钳与LTP;来源和机理;;美国的两位科学家

彼得·阿格雷

罗德里克·麦金农

利用X光绕射方法得到了K离子通道的三维结构，二位因此获得2003年诺贝尔化学奖。;;20世纪初由Cole创造，Hodgkin和Huxley完善，目的是为了证明动作电位的峰电位是由于膜对钠的通透性发生了一过性的增大过程。但当时没有直接测定膜通透性的方法，于是就用膜对某种离子的电导来代表该种离子的通透性。;;;根本原理;电子学部件:放大器；计算机接口，数据采集、分析系统。

光学部件和光电接口：显微镜；监视器等。

机械系统:防震台等。

辅助系统：电极拉制器；切片机；孵育槽；灌流系统等;膜片钳的几种记录模式;1.液体配制：主要根据研究通道的不同，配制相应的液体，根本原那么是保持两个平衡：渗透压平衡和酸碱平衡。所有液体在使用前必须过滤。

2.标本制备

3.记录

4.资料分析：

〔1〕一般电学性质：通过I-V关系计算单通道电导，观察通道有无整流。通过离子选择性、翻转电位或其它通道激活条件初步确定通道类型。

〔2〕动力学：开放时间、开放概率、关闭时间、通道的时间依赖性失活、开放与关闭类型〔簇状猝发样开放与闪动样短暂关闭〕，化学门控性通道的开、关速率常数等。

〔3〕通过对全细胞激活曲线或失活曲线的分析，可得到半数激活或失活电压Vh及斜率因子K。

〔4〕药理学：阻断剂、冲动剂或其它调制因素对通道活动的影响。

〔5〕综合