2025年高考生物一轮复习考点梳理第57课时微生物的培养技术与应用.docxVIP

第57课时微生物的培养技术与应用

课标要求

1.通过配制培养基、灭菌、接种和培养等实验操作获得纯化的酵母菌菌落。2.分离土壤中分解尿素的细菌，并进行计数。

考情分析

1.微生物的基本培养技术

2023·全国乙·T37

2022·天津·T32021·天

津·T1

2.微生物的选择培养和计数

2023·山东·T152023·广东·T102023·北京·T162022·全国甲·T37

2022·全国乙·T372022·广东·T212021·江苏·T18

考点一微生物的基本培养技术

1．培养基的配制

(1)培养基的概念、用途和类型

①概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。

②用途：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。

③培养基的种类(按物理性质分)

培养基种类

培养基特点

作用

固体培养基

加凝固剂，如琼脂

微生物的分离与鉴定，活菌计数，保藏菌种

半固体培养基

容器放倒不致流出，剧烈震动则破散

观察微生物的运动、分类鉴定

液体培养基

不加凝固剂

常用于工业生产、微生物的扩大培养

(2)培养基的配方

①主要营养物质：水、碳源、氮源、无机盐。

②其他条件：pH、特殊营养物质和氧气。如表：

微生物

乳酸杆菌

霉菌

细菌

厌氧微生物

特殊需求

添加维生素

一般pH调至酸性

一般pH调至中性或弱碱性

无氧

2.无菌技术

(1)目的：获得纯净的微生物培养物。

(2)关键：防止杂菌污染。

(3)消毒与灭菌的比较

项目

消毒

灭菌

作用强度

较为温和的理化因素

强烈的理化因素

作用程度

杀死物体表面或内部一部分微生物

杀死物体内外所有的微生物

芽孢和孢子

一般不能杀灭

能杀灭

适用对象

实验操作的空间、操作者的衣着和双手

微生物培养的器皿、接种用具和培养基等

常用方法

煮沸消毒法、巴氏消毒法等

湿热灭菌法、干热灭菌法、灼烧灭菌法等

(4)注意事项

①实验操作时，应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。

②为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行。

3．微生物的纯培养概念辨析

4．纯培养的过程(以酵母菌为例)：包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。

(1)制备培养基

倒平板注意事项：a.温度：50℃左右；b.操作：在酒精灯火焰附近；c.冷凝后平板倒置。

提醒平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，将平板倒置，既可以防止皿盖上的水珠落入培养基，又可以避免培养基中的水分过快挥发。

(2)接种和分离酵母菌

①平板划线法的原理：通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到单菌落。

②平板划线法的操作步骤

(3)培养酵母菌

将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右的恒温培养箱中培养24～48h。

判断正误

(1)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊的物质(√)

(2)倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上(×)

提示倒平板时，用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将锥形瓶中的培养基(10～20mL)倒入培养皿，立即盖上培养皿的皿盖，不能打开皿盖。

(3)为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落(×)

提示接种环灼烧灭菌后，应冷却后再挑取菌落，以免高温杀死菌种。

(4)对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和灭菌(×)

提示对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。

发酵生产啤酒的过程中，杂菌产生的微量副产物是啤酒“上头”的原因之一，可采用平板划线法对酵母菌进行纯化。如图是平板划线操作的示意图，据图回答下列问题：

(1)用图中字母和箭头表示平板划线操作的正确步骤：d→b→f→a→e→c→h→g。

(2)在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？

提示需要；划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免污染环境和感染操作者。

(3)在第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？

提示划线后，线条末端菌种的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使菌种的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个微生物繁殖而来的菌落。

(4)接种结束后，为什么要将一个未接种的培养基和一个已接种的培养基放在一起培养，未接种的培养基表面如果有菌落生长，说明了什么？

提示培养未接种的培养基的作用是对照，未接种的培养基经过培养后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的；若有菌落生长，说明培养基灭菌不彻底，或培养基被污染了，需要重新制备。

考向一微生物的基本培养技术

1．(2022·湖北，4)灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙