特殊染色技术—酶类染色法（病理检验技术课件）.pptx

病理检验技术

;特殊染色;胆碱酯酶

;胆碱酯酶

乙酰胆碱酯酶主要存在于神经元的胞质内、神经与肌肉接头处即所谓运动终板处;

胆碱酯酶主要存在于血浆、胰腺和唾液腺内,其生理功能尚不明确。

两者的化学性质很不相同,胆碱酯酶常用的抑制剂是10-5mol/L毒扁豆碱(eserine),它可抑制乙酰胆碱酯酶和胆碱酯酶,而每10ml孵育液中加入0.2m1的0.004mol/L四异丙基焦磷酰胺可抑制胆碱酯酶而不抑制乙酰胆碱酯酶,是一种较理想的胆碱酯酶抑制剂。

;显示乙酰胆碱酯酶的方法有多种,

如Koell法,Snel和Garrett法、Gerebtzoff改良的Snell和Garrett法,Kamovsky和Roots法等,

但后两种方法较为可靠,特别是Janovsky和Roots的亚铁氰化铜法,虽然其底物对组织的渗透性较差,但操作简便,酶的扩散又少,是一种较好的方法。;亚铁氰化铜法(根据Karnovsky和Roots)

(一)试剂配制

1.0.1mol/L醋酸盐缓冲液(pH5.5)

2.0.lmol/L柠檬酸钠

3.0.03mol/L硫酸铜

4.0.005mol/L铁氰化钾

5.0.004mol/L四异丙基焦磷酰胺

6.孵育液

7.Mayer苏木精液

;(二)染色步骤

1.新鲜组织低温恒冷切片(用液氮快速冷冻效果