特殊染色技术—脂质染色法（病理检验技术课件）.pptx

病理检验技术

;特殊染色;脂质

;(一)试剂配制

1.2.5%的硫酸铁铵

2.冰醋酸硫酸混合液

冰醋酸10ml

浓硫酸10ml

于小滴瓶中倾入冰醋酸,瓶外放以冰块,然后慢慢加入浓硫酸,混合后数分钟即可取出，密封置冰箱保存备用。;(二)染色步骤

1.组织固定于10%的中性甲醛液中3天。

2.半导体制冷切片机切片,厚20μm(用低温恒冷切片机切片也可以,但组织经固定后切片比较困难),置入蒸水内浸洗3次,每次10分钟。

3.用玻璃钩把切片捞入25%的硫酸铁铵液内于室温作用7天,若置入37℃的温箱则作用3天。

4.取出切片,燕馏水洗2次,贴于载玻片上,抹去多余水分,风扇吹干。

5把醋酸硫酸混合液滴在切片正中(根据组织切片大小滴入2~4滴),加上盖玻片即可在镜下观察。;（三）结果

滴入混合液后,开始呈现红色或蓝色是无意义的,可以置之不理。通常在1分钟后出现绿色,即表有胆固醇和胆固醇酯存在,以后颜色逐渐加深。约半小时后,绿色逐渐消退而变为污褐色。

;（四）注意事项

1.本法果用的冰醋酸和硫酸均需高纯度,如封盖后有大量气泡出现,则是酸液不够纯。

此试剂也易吸湿,应密塞置冰箱保存。

2.在操作中不能用手接触切片,因汗液含有胆固醇,可导致阳性反应。

3在滴入冰醋酸硫酸混合液后,要经常注意观察切片颜色的改变,此法反应较慢,半小切片呈污褐色即失去作用,切片不能