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第24卷第1期中国食品学报Vol.24No.1

2024年1月JournalofChineseInstituteofFoodScienceandTechnologyJan.2024

黑豆纳豆激酶粗提取物的免疫调节作用

田玥玮，张永坡，高春艳，赵晋忠，杜维俊2

（山西农业大学基础部山西晋中030801

2山西农业大学农学院山西晋中030801)

摘要以壶关大黑豆为原料发酵纳豆，分离得到黑豆纳豆激酶粗提取物（BNCE)，对其结构进行初探，测定其酶活力和溶栓

能力，并研究BNCE的免疫调节作用。通过红外光谱分析和扫描电镜对BNCE结构进行鉴定；分别使用纤维蛋白平板法和

动物血块法测定BNCE的酶活及其对小鼠血块的体外溶栓作用；用MTT比色法探究BNCE对RAW264.7细胞增殖的影

响；中性红染色法测定BNCE对RAW264.7细胞吞噬率的影响;ELISA法检测BNCE对RAW264.7细胞分泌IL-6、TNF-α

和IL-1β的影响。结果表明,BNCE具有蛋白质的化学结构，表观呈现大小不同且无规则的碎片形状，具有一定的纤溶活性

和体外溶栓作用。BNCE可以促进正常状态以及LPS激活状态下RAW264.7细胞的增殖，增强其吞噬率，并且有浓度依赖

性。另外,BNCE还可以促进正常状态下的RAW264.7细胞TNF-α和IL-1β的分泌，抑制IL-6的分泌；也能抑制LPS激活

状态下RAW264.7细胞IL-6、TNF-α和IL-1β的分泌。因此，BNCE具有一定的免疫调节作用，在食品工业上可以作为保健

食品的一种优质原料。

关键词黑豆；纳豆激酶；溶栓作用；RAW264.7细胞；免疫调节

D0I:10.16429/j.1009-7848.2024.01.004

文章编号1009-7848(2024)01-0031-10

纳豆是以煮熟的大豆为原料，通过接种纳豆beannattokinasecrudeextract,BNCE)。

菌发酵而成的一种传统保健食品叫，除了含有纳豆动物实验表明，纳豆激酶通过口服给药能减

激酶、SOD、异黄酮等多种活性物质外,还富含氨少大鼠颈动脉形成的血栓质量，具有显著的溶栓

基酸、有机酸、寡聚糖等有益于人体肠道健康的营效果叫。本文以不同浓度的BNCE进行处理,研究

养成分。近年来，由于人们越来越关注纳豆类产其对小鼠的体外溶栓作用，以期为黑豆纳豆激酶

品的保健功能，国内外学者研究了纳豆及其主要溶栓作用的深人研究提供数据支持。

活性物质纳豆激酶的多种功能作用3],结果发现其除此之外，有研究发现许多天然产物成分对

RAW264.7细胞具有免疫促进[12]或免疫抑制[13]或

具有治疗心血管疾病[4]、溶解血栓[5]、降血压[6]、抗

癌7、抗氧化8等保健功能。黑豆含有多酚、花色苷、二者兼具的双向免疫调节作用[14]。目前关于纳豆

黄酮等多种活性物质，相对于黄豆含量更高,因此激酶的免疫调节作用尚未见报道。为研究BNCE

黑豆更具药用价值9。研究表明，食用黑豆能够增对细胞免疫调节的影响，本研究以RAW264.7细

加多酚浓度，有助于改善血管功能,并通过减少人胞为试验模型，研究BNCE对正常状态及脂多糖

体氧化应激,从而降低患心血管疾病的风险[10]。本（LPS）激活状态下RAW264.7细胞的免疫调节作

文以壶关大黑豆为原料，发酵制备提取纳豆激酶用，以期为纳豆激酶的免疫调节作用机制提供理

粗提取物，得到黑豆纳豆激酶粗提取物（Black论依据。