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首都师范大学生物实验报告
科目：细胞生物学班级：师范班姓名：王攀学号：1110800065
实验名称：植物细胞程序性死亡(PCD的诱导、形态观察日期：10.30
一、实验目的：
1、了解植物细胞PCD的概念
2、掌握植物细胞PCD的诱导方法、和统计方法
3、了解动物细胞凋亡过程的方法
实验原理:
1、细胞死亡：细胞死亡作为生物体的一种常见现象，在动物细胞中有三种方式：凋亡
(apoptosis)，自噬(autophagy)和坏死(necrosis)。前两种类型属于细胞程序性死亡(programmed
celldeath，PCD)。细胞坏死是细胞在遭受极度刺激时引起的细胞死亡，以细胞质膜的破裂为特征，
造成内含物的炎性泄露，是一种非正常死亡。细胞的PCD是细胞的
一种主动性”死亡行为，从形态上和功能上都与细胞坏死有很大的不同。
2、植物中细胞程序性死亡(PCD：目前可依据液泡膜破裂后，是否在细胞质中发生快速降
解将PCD分为两个大类。第一类为自溶性(autolytic)PCD,与液泡中的水解酶的释放有关，在液泡破
裂后，导致细胞质的快速清除。第二种为非自溶PCD,(non-autolytic)，即液泡膜
破裂但是没有出现快速的细胞质的清除。目前鉴定细胞的PCD类型，还是以细胞形态学为
主。
3、动植物细胞凋亡标准：动物：凋亡：凋亡小体，或者在细胞表面的水泡，感染病原体
后在其他细胞中的降解。自噬：自噬小体，自溶酶体，和小的促进细胞溶解的液泡数目的增
加坏死：没有上面的定义的标准。植物：自溶：植物膜破裂之后对细胞质的快速清理。非
自溶：没有对细胞质的快速清理。其他：染色质浓缩细胞核破裂自我标记信号自食信
号细胞膨胀，细胞器膨胀，质膜破裂染色质浓缩。液泡体积增加(细胞质体积减小)需
要Ca2+的内流，细胞质皱缩，细胞器膨胀，小泡增多但体积不增加。
三、实验步骤
1、植物细胞凋亡：加入较高浓度的CaCL2诱导，观察和统计诱发产生的PCD细胞。用改良
(
苯酚品红染色观察PCD细胞核发生染色质凝集condensation)、趋边化(margination)、产
生PCD小泡等形态学上的变化。
(1)形态观察：洋葱内表皮，100mmol/LCaCI2500mmol/LCaCI2(注意都用PBS(6.5)配置)
处理两小时，用于形态观察和凋亡统计。
(2)PCD计数
2、动物细胞凋亡观察：观看录像。
四、实验材料
洋葱鳞茎内表皮、细胞PCD诱导剂一一Ca2+、形态学观察染色液改良苯酚品红
五、实验结果
1、植物细胞凋亡观察:
(1)观察数据:
处理计数PCD率(平均)
0.1M47/116（46/115108/2630/12023/9331%
如
CaCI2（C）（E）
（B）如图（D）如图
图A）如图如图
2hr
（）
PCD率41%4
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