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人羊膜上皮干细胞外泌体

1范围

本文件规定了人羊膜干上皮干细胞来源外泌体的技术要求、检验方法、检验规则、使用说明、标签、

包装、储存、运输和废弃物处理要求。

本文件适用于人羊膜上皮干细胞来源外泌体的生产和检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件。不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

WS213丙型肝炎诊断

WS273梅毒诊断

WS293-2019《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断》

T/LNSI002-2023《人羊膜上皮干细胞》

T/CSCB0007-2022《人干细胞来源细胞外囊泡制备通用要求》

T/CSCB0001-2022《人干细胞研究伦理审查技术规范》

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

中华人民共和国药典（2020年版）

全国临床检验操作规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1干细胞stemcells

1

干细胞是来自于胚胎、胎儿或成人体内具有在一定条件下无限制自我更新与增殖分化能力的一类细

胞，能够产生表现型与基因型和自己完全相同的子细胞，也能产生组成机体组织、器官的已特化的细胞，

同时还能分化为祖细胞。

3.2人羊膜上皮干细胞humanamnioticepithelialstemcells

位于羊膜的胎儿面，是由胚泡内细胞团发育而来，具有部分胚胎干细胞的特征，可分化为3个胚

层不同类型的细胞。具有低免疫原性和无端粒酶活性特性。体外贴壁培养细胞呈不规则多角型，如鹅卵

石样连接成片。

3.3外泌体exosome

外泌体是细胞分泌的膜外双层脂质小囊泡，直径30~200nm，包含了蛋白质、脂质、多糖及RNA

等物质，可以转运核酸、脂质和蛋白质，参与细胞间的信息交流。

3.4人羊膜上皮干细胞外泌体humanamnioticepithelialstemcellderivedexosome

人羊膜上皮干细胞外泌体是人羊膜上皮干细胞分泌的膜外双层脂质小囊泡，粒径应小于200纳米，

呈双层膜结构的杯托状结构。

4符号和缩略语

下列符号和缩略语适用于本文件。

EBV——疱疹病毒（Epstein-BarVirus）

HBV——乙型病毒性肝炎（HepatitisBVirus）

HCMV——人巨细胞病毒（HumanCytomegalovirus）

HCV——丙型肝炎病毒（HepatitisCVirus）

HIV——人类免疫缺陷病毒（HumanImmunodeficiencyVirus）

HTLV——人类嗜T细胞病毒（HumanT-lymphotropicVirus）

TP——梅毒螺旋体（TreponemaPallidum）

5技术要求

5.1原材料

2

5.1.1应符合T/CSCB0001-2022要求。

5.1.2应建立供者细胞采集的供者评估与筛选标准、采集方法、运输标准和交接标准，保证供者和细

胞的安全。

5.1.3供体应筛查HIV、HBV、HCV、HTLV、EBV、HCMV和TP，并记录结果。

5.2制备与纯化方法

5.2.1人羊膜上皮干细胞

人羊膜上皮干细胞关键质量属性应符合T/LNSI002-2023的规定。

5.2.2人羊膜上皮干细胞培养上清

为了获得高质量的外泌体，收获外泌体最佳时间限定为P-P代人羊膜上皮干细胞，要求融合率达

02

95%以上的细胞上清。

5.2.3外泌体的制备与纯化应符合T/CSCB0007-2022的要求。

5.3关键质量属性

5.3.1形态

透射电显微镜观察，外泌体形态为双层膜结构的杯托状结构。

5.3.2粒径

外泌体粒径应小于200nm，且在60-120nm范围内形成粒径峰值。

5.3.3浓度