人参皂苷CK的含量测定 高效液相色谱法.pdfVIP

人参皂苷CK的含量测定

高效液相色谱法

1范围

本标准规定了测定人参皂苷CK含量的高效液相色谱法。

本标准适用于不同纯度或来自不同制备工艺的人参皂苷产品及其制品中人参皂苷CK含量的测定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析试验室用水规格和试验方法

GB/T26792高效液体色谱仪

中华人民共和国药典四部

GB/T41726-2022人参单体皂苷鉴定及检测方法

GB/T16631-2008高效液相色谱法通则

GB/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定

T_CNHFA001-2021人参稀有皂苷的含量测定

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

人参皂苷CK：从五加科植物人参PanaxginsengC.A.Mey.的干燥根及根茎经加工、转化和纯化制

成的皂苷单体。

4原理

人参皂苷及其制品试样用甲醇超声振荡溶解，过滤后注入高效液相色谱仪进行分离，采用紫外检测

器检测，通过比较样品与标准样品的保留时间来识别人参皂苷CK，并用外标法进行定量。

5试剂与材料

5.1试剂

5.1.1水：GB/T6682所规定的一级水。

5.1.2乙腈（CHCN）：质谱纯。3

5.1.3甲醇（CHOH）：质谱纯。3

5.2标准品

人参皂苷CK标准品：质量分数≥98%，CAS号：39262-14-1。

5.3标准溶液制备

5.3.1人参皂苷CK标准溶液（1.000mg/mL）：准确称取25mg（精确至0.01mg）人参皂苷CK标准

品至25mL容量瓶中，加入适量甲醇溶解，继续加入甲醇至刻度线，超声振荡10min，摇匀，用0.22

μm有机滤膜过滤，得到浓度为1.000mg/mL标准品溶液，置于4℃下密封可贮藏一个月。

5.3.2人参皂苷CK标准工作液：分别吸取0.50，1.00，2.50，5.00mL人参皂苷CK标准溶液到10mL

1

容量瓶中，用甲醇定容，得到浓度分别为0.0500，0.1000，0.2500，0.5000，1.000mg/mL的系列标准

溶液。

6仪器和设备

6.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器。

6.2分析天平：感量0.0001g和0.00001g。

6.3精密移液器。

6.4真空脱气装置或类似设备。

6.5有机微孔滤膜：0.45μm和0.22μm。

6.6超声处理器。

7试验方法

7.1样品制备

7.1.1称样：人参皂苷CK含量大于或等于10%的固体粉末试样称取0.2g～0.5g（精确至0.0001g）；

含量小于10%的液体试样称取2g～10g（精确至0.0001g），对于人参皂苷CK含量含量更低的样品可

适当增加称样量。

7.1.2提取：称好的试样转至25mL容量瓶中，加入甲醇至刻度线，超声振荡30分钟，摇匀，用0.22

μm有机滤膜过滤，即得测试溶液。

7.2测定

7.2.1色谱参考条件

优化仪器工作条件，使测试样品和标准品中各组分得到满意的色谱分离，以下色谱条件供参考：

a)色谱柱：建议使用双封端的C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm）或等效色谱柱。色谱柱

的新旧程度和使用情况、填料填装状态以及温度会影响各组分的分离；

b)流动相：A相为乙腈，B相为水，梯度洗脱条件见表1；

c)检测器：紫外检测器；

d)检测波长：203nm；

e)流速：1mL/min；

f)柱温：30℃；

g)进样量：20μL。

表1液相色谱梯度洗脱条件

时间（min）A（%）B（%）

019.0