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Nextseq500简易操作流程
一、开机
打开电源开关切换到I(on)的位置,按下试剂室上方的电源按钮后开机
二、关机
1.点击界面上的ManageInstrument按钮
2.选择SystemPowerOptions
3.点击关机
安全关机的方式应先关闭电脑软件再关闭电源,再次打开仪器时需等待至少60s
注意:仪器放置后不要随便移动,移动机器可能会影响其光线的校准和破坏数
据的完整性,如果需要重新移动仪器,需要联系Illumina公司相关技术人员。
三、测序工作流程
使用IlluminaBaseSpace进行配置
根据实验需要选择合适的试剂盒
变性和稀释文库
将处理好的文库加到试剂盒10号样
品孔里
从软件界面,选择序列开始运行设置
步骤
载入flowcell
将试剂室清空,加入buffer和试剂盒
检查运行参数和自动检查的结果,确
认后开始
数据分析处理
测序完成后仪器维护清洗
试剂盒准备
①取出保存在-20℃中的试剂盒,室温水浴60min后将试剂盒表面的水擦干,注
意水浴过程中不要浸没试剂盒;(或将试剂盒放在2℃-8℃融化过夜,至少需要
18h融化,在2℃-8℃下,试剂能稳定使用一周)
②轻轻来回摇晃5次混匀试剂盒;
③检查29,30,31和32孔,确定试剂都已经融化完全;
④轻敲桌面排除气泡。
注意:试剂盒中含有甲酰胺,具有一定的毒性,注意不要吸入、摄取、皮肤和
眼睛接触到,实验时注意穿好防护措施,包括防护镜、手套和实验服,处理使
用过的试剂时应严格按照政府规定的安全标准。
FlowCell准备
①取出保存在2℃-8℃的FlowCell,在室温下放置30min后拆开铝箔包,打开
透明塑料翻盖包后取出FlowCell。
②用沾有少量的低棉絮酒精棉轻轻擦拭FlowCell,并用低棉絮擦干剩余酒精。
注意:①使用前确保FlowCell未破损;
②确保端口垫圈和白色塑料的帖子完好无损。
③确保四个白色固定夹卡在黑色承板的边缘,如果发现承板在夹子下不
安全,轻轻一起按下黑色承板和白色框架直到板卡在夹子上。
④确保4个金属弹簧夹平对黑色的承板。
A.端口垫圈
B.固定夹
C.弹簧夹
D.白色框架
E.承板
文库加载到试剂盒
①用低棉絮酒精棉将试剂盒上的#10labeledLoadLibraryHere擦干净,并用
1ml移
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