Nextseq500简易操作流程.pdfVIP

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Nextseq500简易操作流程

一、开机

打开电源开关切换到I(on)的位置,按下试剂室上方的电源按钮后开机

二、关机

1.点击界面上的ManageInstrument按钮

2.选择SystemPowerOptions

3.点击关机

安全关机的方式应先关闭电脑软件再关闭电源,再次打开仪器时需等待至少60s

注意:仪器放置后不要随便移动,移动机器可能会影响其光线的校准和破坏数

据的完整性,如果需要重新移动仪器,需要联系Illumina公司相关技术人员。

三、测序工作流程

使用IlluminaBaseSpace进行配置

根据实验需要选择合适的试剂盒

变性和稀释文库

将处理好的文库加到试剂盒10号样

品孔里

从软件界面,选择序列开始运行设置

步骤

载入flowcell

将试剂室清空,加入buffer和试剂盒

检查运行参数和自动检查的结果,确

认后开始

数据分析处理

测序完成后仪器维护清洗

试剂盒准备

①取出保存在-20℃中的试剂盒,室温水浴60min后将试剂盒表面的水擦干,注

意水浴过程中不要浸没试剂盒;(或将试剂盒放在2℃-8℃融化过夜,至少需要

18h融化,在2℃-8℃下,试剂能稳定使用一周)

②轻轻来回摇晃5次混匀试剂盒;

③检查29,30,31和32孔,确定试剂都已经融化完全;

④轻敲桌面排除气泡。

注意:试剂盒中含有甲酰胺,具有一定的毒性,注意不要吸入、摄取、皮肤和

眼睛接触到,实验时注意穿好防护措施,包括防护镜、手套和实验服,处理使

用过的试剂时应严格按照政府规定的安全标准。

FlowCell准备

①取出保存在2℃-8℃的FlowCell,在室温下放置30min后拆开铝箔包,打开

透明塑料翻盖包后取出FlowCell。

②用沾有少量的低棉絮酒精棉轻轻擦拭FlowCell,并用低棉絮擦干剩余酒精。

注意:①使用前确保FlowCell未破损;

②确保端口垫圈和白色塑料的帖子完好无损。

③确保四个白色固定夹卡在黑色承板的边缘,如果发现承板在夹子下不

安全,轻轻一起按下黑色承板和白色框架直到板卡在夹子上。

④确保4个金属弹簧夹平对黑色的承板。

A.端口垫圈

B.固定夹

C.弹簧夹

D.白色框架

E.承板

文库加载到试剂盒

①用低棉絮酒精棉将试剂盒上的#10labeledLoadLibraryHere擦干净,并用

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