高中生物同步备课系列【备学案】3.1 重组DNA技术的基本工具 导学案（学生版）-人教2019版选择性必修3.pdf

第3章基因工程

第1节重组DNA技术的基本工具导学案

【生命观念】阐明重组DNA技术所需的三种基本工具的作用。

【科学探究】进行DNA的粗提取与鉴定。

【社会责任】认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。

【教学重点】

1.重组DNA技术所需的三种基本工具的作用。

2.DNA的粗提取与鉴定。

【教学难点】

1.基因工程载体需要具备的条件。

2.DNA的粗提取与鉴定。

基因工程是指按照人们的愿望，通过______等技术，赋予生物新的__________，创造出更符合人们

需要的新的__________和__________。从技术操作层面看，由于基因工程是在__________水平上进

行设计和施工的，因此又叫作__________技术。

（1）原理：__________。（2）操作水平：_________。（3）操作环境：_________。

一、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”

1.来源：主要是从__________中分离纯化出来的。

2.作用：识别双链DNA分子的特定__________，并且使每一条链中特定部位的_______

_____断开。

3.作用部位：__________，限制酶只切割两个核苷酸之间的__________。

4.限制酶的命名：用生物属名的头一个字母与种加词的头两个字母，组成了3个字母的略语，以此

来表示这个酶是从哪种生物中分离出来的。例如，一种限制酶是从大肠杆菌（Escherichiacoli）的R

型菌株分离来的，就用字母EcoR表示；如果它是从大肠杆菌R型菌株中分离出来的第一种限制酶，

则进一步表示成EcoRI。

【思考】你能根据所掌握的知识，推测限制酶存在于原核生物中的主要作用是什么吗？

5.识别序列：大多数限制酶的识别序列由_____核苷酸组成，也有少数限制酶的识别序列由_____、

_____或__________的核苷酸组成。

限制酶所识别的序列的特点是：呈现_______________，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找

到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的，称为__________。

6.切割结果：DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式——_____末端和_____

末端。

（1）实例1—EcoRⅠ限制酶：EcoRⅠ识别序列为__________，EcoRⅠ切割部位为_____之间的磷酸

二酯键，形成__________。

（2）实例2——SmaⅠ限制酶：SmaⅠ识别序列为__________，SmaⅠ切割部位为_____之间的磷酸

二酯键，形成__________。

【例1】写出下列限制酶切割形成的黏性末端

二、DNA连接酶——“分子缝合针”

1.作用：将两个__________连接起来，恢复被限制酶切开的__________。注意：不是连接氢键（氢

键的形成不需要酶的催化）。

2.分类：

种类E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶

来源

功能特性

相同点

【思考】DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？为什么？

种类DNA聚合酶DNA连接酶

作用实质

不

同

点作用结果

模板

相同点

3.DNA连接酶、DNA聚合酶、限制酶、解旋酶的比较

种类作用底物作用部位形成产物

DNA连接酶

DNA聚合酶

限制酶

解旋酶

三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”

1.作用：将__________送入_____细胞。

2.种类：质粒、__________和_______________等。它们的来源不同，在大小、结构、复制方式以及

可以插入外源DNA片段的大小上也有很大差别。

最常用的载体——质粒：一种裸露的、结构_____、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之

外，并具有__________能力的_______________分子。

3.作为载体需具备的条件

（1）有一个至多个_______________，供____________________插入其中。

（2）能在细胞中进行__________或整合到__________上，随受体DNA同步_____。

（3）常有特殊的____