动物实验方法总结:组织研磨管的使用方法 临床样本或动物取材注意事项 动物模型.pdfVIP

动物实验方法总结:组织研磨管的使用方法 临床样本或动物取材注意事项 动物模型.pdf

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组织研磨管的使用方法

1.作用:只适用于蛋白提取、RNA提取、基因组DNA提取时的组

织裂解,不做他用;

2.组织研磨管:容量为1.5ml,里面已经提前放置了研磨珠(有时也

不放置),研磨液(Trizol或RIPA裂解液,有时也不放置)一般

在取回后才加入,如果已经加入了研磨液,请离心后才拧开管盖,

以免研磨液溢出,对皮肤造成伤害,所以操作时,要小心注意!

3.组织:把收取的组织分切,用生理盐水或PBS缓冲液把分切的组

织上的血液漂洗干净,然后用医用纱布或滤纸把组织表面的水分

吸干,然后放入研磨管(组织体积大小为1颗绿豆至2颗黄豆,

根据实际情况决定)中,然后把放入的组织尽量剪碎;

4.存放:上述过程应尽量在最短的时间内操作完毕,立即用液氮冻

结,然后置于液氮或-80℃保存;

5.操作事项:操作时间尽可能短,做好一个,立马放置一个;

实验方法总结(3):动物模型部分

1、研究肿瘤细胞增殖2

2、研究肿瘤细胞转移3

2.1.体外(浸润模型).3

2.2.体内(转移模型).3

3、研究肿瘤细胞耐药5

3.1.耐药细胞株的建立5

3.2.裸鼠移植瘤耐药模型的建立.6

从肿瘤起源分,肿瘤动物模型的分类如下:

实验动物肿

瘤模型

自发性肿瘤诱发性肿瘤移植性肿瘤人体肿癌的

模型模型模型异种移植性

原位诱发异位诱发原位移植异位移植

同种可移植异种可移植

性肿瘤性肿瘤

从研究目的来分,可以从增殖、转移、耐药三个角度来分析:

1、研究肿瘤细胞增殖

细胞准备:GeneA敲减慢病毒感染细胞扩增至需要的细胞量。分为:空白对照

组、阴性对照组、实验组。

取Balb/c裸鼠,雄性,6周龄,每组10只,适应一周后进行肿瘤细胞注射。

XXX细胞消化离心后制成单细胞悬液,计数后取适量的细胞用PBS悬浮,在

Balb/c裸鼠侧腹部皮下接种。每只接种2×10个细胞,注射体积为100μL。

6

此后,每隔5天测量注射部位肿瘤的体积。30天后裸鼠小鼠腹腔注射80mg/kg

戊巴比妥钠,小鼠麻醉后置蓝色背景布上拍照(侧卧位,接种部位朝上),小鼠

颈椎脱臼处死,取出肿瘤称重,将肿瘤置蓝色背景布上拍照,肿瘤一分为二,一

份4%多聚甲醛固定,待后续病理分析,一份-80℃冻存。

2、研究肿瘤细胞转移

肿瘤转移的模型包括两大类:体外(浸润模型)和体内(转移模型)。体外(浸润模

型):了解肿瘤细胞对周围相连组织的侵润性。体内模型主要研究肿瘤细胞的转

移性即肿瘤细

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