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P27kip1和Skp2在食管癌中的表达（医学论文）

P27kip1和Skp2在食管癌中的表达作者：

宋旭东李志强朱海燕【摘要】目的：

探讨p27Kip1,Skp2蛋白在食管癌发生、恶性增殖及转移扩散中的作用及二者间的相互关系.方法：

运用免疫组织化学EnVision法检测p27Kip1，Skp2蛋白在97例食管癌、30例食管癌旁组织标本中的表达情况.结果：

P27kip1与Skp2蛋白的阳性表达率在癌旁组(93.33%,0%)与食管癌组(45.36%,48.45%)，淋巴结转移阳性组(31.71%,63.41%)与阴性组(55.36%,37.50%)，高分化组(62.96%,29.63%)与中(42.22%,53.33%)，低分化组(32.00%,60.00%)之间差异有显著性（Plt;0.01），而与食管癌肿瘤的大小、性别、患病年龄和临床分期无关（Pgt;0.05）.结论：

p27Kip1，Skp2蛋白表达与食管癌的分化程度及淋巴结的转移状况有关，分化程度低者或伴随有淋巴结转移者，p27Kip1蛋白表达明显降低，相反，Skp2蛋白则明显增高，而且二者呈负相关.【关键词】P27kip1Skp2食管肿瘤0引言目前的研究表明恶性肿瘤细胞增殖失控是细胞周期校正点控制紊乱的结果.P27kip1是细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子（cyclindependentkinaseinhibitor,CKI）家族的成员，S期激酶伴随蛋白2（Sphasekinaseassociatedprotein2,SKP2）是泛素蛋白酶降解途径中Fbox蛋白家族中一员，而P27kip1的水解则主要是通过泛素蛋白酶体途径完成.因而，研究p27kip1，Skp2蛋白在食管癌中的表达，探讨二者在食管癌细胞增殖、转移中的作用及相互关系，对揭示食管癌发生、发展的机制意义重大.1材料和方法1.1材料1.1.1标本来源标本均源于华北煤炭医学院附属医院200201/200410手术切除标本，所有标本术前均未经任何放化疗和其它抗肿瘤治疗.其中食管癌标本97例，癌旁食管组织30例（距癌组织5cm，经病理证实无癌细胞）.所有病例的临床资料及病理资料完整，包括病灶的大小、组织学分型与分级、淋巴结转移、TNM分期等内容.食管癌的临床分期依照1976年全国拟定的食管癌临床病理分期标准，组织分型与分级标准采用1990年WHO食管癌的分型及分级标准.其中高分化27例，中分化45例，低分化25例.组织学分型食管鳞癌91例，腺癌6例.1.1.2主要试剂鼠抗人p27kip1单克隆抗体、鼠抗人Skp2单克隆抗体及即用型EnVision免疫组化试剂盒均购于福州迈新生物技术开发有限公司.1.2方法组织切片经脱蜡至水后，参照说明书内容行EnVision免疫组化染色.采用试剂盒内已知阳性的食管癌切片做阳性对照，以PBS代替一抗做空白对照.结果参照Tanaka等的判定标准，以免疫组织化学记分值作为阳性的评判标准.记分值的算式为H=NI.N代表随机观察的10个高倍镜视野中平均阳性细胞数记分.平均阳性细胞数＜10%为0分，10%~29%为1分，30%~59%为2分，60%~74%为3分，75%为4分.I代表着色强度记分值，1分：

弱（+，淡黄色），2分，中等（，棕黄色），3分：

强（，深棕黄色）.显色强度与背景无明显差别者为阴性.若H＞1为阳性，若H1则为阴性.统计学处理：

实验结果采用SPSS12.0统计学软件进行分析处理，采用方差分析组间差异、卡方检验二者之间的相关性.P＜0.05为差别有统计学意义.2结果2.1P27kip1，Skp2蛋白在食管癌及癌旁食管上皮中的表达P27kip1，Skp2蛋白染色主要位于细胞核，部分胞质Skp2染色阳性，极少部分胞质P27kip1染色阳性，染色呈粗细不一的黄色至深棕黄色颗粒（图1，2）.97例食管癌中，P27kip1蛋白阳性者44例，Skp2蛋白阳性者47例