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《内分泌干扰物检测转基因斑马鱼法》
编制说明
一、任务来源及起草单位
1.任务来源
斑马鱼作为一种小型脊椎类模式生物,在全球范围内已有90多年的研究历史,在药品、保健食品及食
品等领域的应用已得到大量相关领域企业的认可。斑马鱼试验既有体外试验快速、高效的特点,又具备哺
乳动物试验相关性好、预测性高的特点,并且符合国际动物福利保护趋势,当下已经取得了显著的科研和
产业化成果。
在此背景下,环特生物向中国乳制品工业协会提交了《内分泌干扰物检测斑马鱼法》团体标准立项申
请。中国乳制品工业协会组织专家召开的标准立项审核论证会通过了该团标的立项申请,并确定由杭州环
特生物科技股份有限公司牵头承担标准起草任务。该项标准旨在建立类雌激素物质检测的新标准,弥补现
有检测方法在检测敏感性和操作便捷性方面的不足。
2.起草单位及人员名单
起草单位:杭州环特生物科技股份有限公司、黑龙江飞鹤乳业有限公司、完美(广东)日用品有限公
司、朴诚乳业(集团)有限公司、云南云科特色植物提取实验室有限公司、浙江省食品药品检验研究院、
国家食品安全风险评估中心、内蒙古蒙牛乳业(集团)股份有限公司、中国农业科学院农业质量标准与检
测技术研究所、宁波海关技术中心、君乐宝乳业集团、南京歆佳医药科技有限公司。
起草人名单:徐懿乔、朱晓宇、曹兵兵、解庆刚、毛新亮、高业成、张迎春、王飞飞、代荣波、贾旭
东、刘姗、梁晶晶、赵超群、逯刚、董立雅、邱静、刘汉伟、黄亚芳、周佳丽、黄燕烽、缪文钰。
3.起草组分工
标准制订工作的组织、方法开发、方法验证和标准文本起草:杭州环特生物科技股份有限公司。
提供方法验证的样品、提供相关样品的标准方法测试数据、标准内容审核与修订:浙江省食品药品检
验研究院、国家食品安全风险评估中心、宁波海关技术中心、南京歆佳医药科技有限公司。
标准内容审核与修订:黑龙江飞鹤乳业有限公司、完美(广东)日用品有限公司、朴诚乳业(集团)
有限公司、云南云科特色植物提取实验室有限公司、内蒙古蒙牛乳业(集团)股份有限公司、中国农业科
学院农业质量标准与检测技术研究所、君乐宝乳业集团。
二、标准编制的目的和意义
环境雌激素(EnvironmentalEstrogens,EEs)是一类环境中存在的能干扰内分泌系统的正常生理和生
化功能的化学物质,三大主要的EEs有1、生物来源雌激素,2、人工合成雌激素,3、环境化学污染物。乳
制品中天然存在内源性雌激素,主要包括雌酮、β-雌二醇、雌三醇,其中β-雌二醇的活性最强,在正常情
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况下含量很低,并不会扰乱人体的生理机能和激素代谢;另外还可能有人为添加的,属于人工合成的外源
性雌激素,最具代表性的是二苯乙烯类合成雌激素,主要有己烯雌酚,己二烯雌酚,己烷雌酚等,它们可
以进入动物体内,通过干扰动物体内源性雌激素的合成、分泌、转运、结合、活性反应、代谢、消解或产
生类似生物体内源性雌激素的作用。而己烷雌酚、己烯雌酚、双烯雌酚都属于人工合成的雌性激素,是
1,2-二苯乙烯类化合物,具有促进动物生长的特性,作为生长促进剂用在牛羊等家畜的饲养过程中长期使
用。多种可促进动物生长的代用物的效力都远不如己烯雌酚,以致使己烷雌酚、己烯雌酚、双烯雌酚特别
是己烯雌酚等人工合成的雌性激素在动物生产过程中的使用禁而不止。现已证实这些人工合成的雌性激素
可在动物的肝脏、肌肉中残留。如果人们长期食用这种激素含量较高的动物产品,会导致产生诸如儿童性
早熟、成年人癌症等负面影响,因此应严格控制食品中雌激素的含量。
可检测有雌激素活性的物质的存在方法很多。理化检测通常检测的是结构已知的物质,但雌激素种类
繁多,结构差异大,化学结构与生物活性的相关性难以预测。生物学检测可以很好模拟人病理吸收代谢机
制,因此,在这种差异性大的检测指标中,生物学检测体现出极大的优势。
斑马鱼(Zebrafish)具有个体小、繁殖率高、生长周期短、胚胎透明、与人类基因的同源性高、易于
进行转基因操作并得到基因突变体,成为研究脊椎动物环境毒理学的理想模式生物。斑马鱼已被欧美和中
国监管部门广泛认可,欧洲经济与合作发展组织(OECD)已经颁布了10余项斑马鱼环境毒理学评价指
南。OECD和日本的生殖毒理学家采用斑马鱼作为检测水环境内分泌干扰物浓度的早期敏感对象。斑马鱼
中有三个基因与哺乳动物雌激素受体(ERs)同源:e
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