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《基因工程》思考题

第一章绪论

1.简述基因操作、基因重组和基因工程的关系。

2.为什么说基因工程是生物学和遗传学发展的必然产物？

3.简述基因的结构组成对基因操作的影响。

4.谈谈你对gene的认识，并简要说说gene概念的演变过程.

5.如何理解gene及其产物的共线性和非共线性？

6.试从理论和技术两个方面谈GeneEngineering诞生的基础.

第二章基因工程的基本原理与支撑技术

1.试比较原核基因组与真核基因组的结构和功能特点

2.试比较原核基因和真核基因表达调控的主要方式和特点

3.分析比较琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳的异同点？

4.琼脂糖凝胶电泳中，简述影响DNA在凝胶中迁移速率的因素.

5.小量制备质粒DNA，用质粒中特定的酶切发现切割不动，试分析可能原因及克服方法？

6.在基因操作实践中有哪些检测核酸和蛋白质分子量的常规方法？

7.印迹分子杂交有哪些种类，并说明在什么情况下需要使用这些方法。

8.核酸分子的标记有哪些方法，各有何特点？

9.由mRNA反转录成cDNA和DNA的PCR扩增是两个完全不同的酶催化反应过程，如何将两

个过程联系在一起，实现由mRNA起始扩增出DNA？

10.Primer是PCR反应体系的四大要素之一，PCR的许多应用都是通过primer设计来实现的，

请问primer设计的一般原则是什么？

11.在PCR反应的后期，或者循环次数过多时，反应体系中就会出现一种所谓的平台效应

（Plateaueffect），请问什么叫Plateaueffect？产生Plateaueffect的原因有哪些？

12.在对PCR产物进行电泳检测时，有时会出现拖带或非特异性扩增条带，请分析其原因？

如果检测结果是看不到DNA带或DNA带很弱，那又是为什么？

13.通过双向蛋白质电泳发现某蛋白质与某植物的一种表型密切相关，若要利用编码该蛋白

质的基因来转基因植物，试问如何分离得到该基因？

14.现有一序列已知的DNA片段和一序列未知的DNA片段，你分别如何设计测序策略？

15.设想一下在什么情况下你希望知道一个基因或一段DNA的序列？

16.什么叫有性PCR？有性PCR导致DNA重组的分子机制跟体内重组有何异同？

17.ExplainthePCR.Listthestepsincarryingitout;includeallthecomponentsandspecial

conditions,explainingwhyeachoneisused.Illustratetheprocesswithappropriatelabels.Use

thecorrectscientificterminologyinyourexplanation.

第三章基因工程操作的基本条件

1.试指出影响限制性内切核酸酶（Restrictionendonuclease）切割效率的因素.

2.在酶切缓冲液中，一般需加入BSA，请问加入BSA的作用是什么？并简述其原理？

3.何谓Staractivity？简述Staractivity的影响因素及克服方法.

4.某DNA序列中存在DpnI酶切位点，以此DNA为模板，在体外合成DNA序列，当用该酶进

行酶切时，发现切割不动，试分析可能原因？

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5.天然的质粒载体（plasmidvectors）通常需经改造后才能应用，包括去除不必要的片段，

引入多克隆位点等。试问在此过程中如何增减酶切位点？

6.当向细菌培养基中加入氯霉素时，可以使细菌质粒的拷贝数得到扩增，试分析其原理.

7.抗性基因（Resistantgene）是目前使用的最广泛的选择标记，常用的抗生素抗性有哪几

种？并举两例说明其原理.

8.常用的受体细胞有哪些?各有什么特点?

9.在基因工程中,选择受体细胞时要考虑什么问题?

第四章基因工程的基本操作过程

1.简述大肠杆菌的经典转化操作过程。

2.用作电转化的宿主细胞也必须处于“感受态”，这种感受态与传统的感受态有何不同？

3.电转化技术还有哪些应用？

4.DNA转化有哪些方法，各有何优点？

5.Explainwhatrestrictionenzymesare,