川芎嗪对胃癌细胞及血管内皮细胞增殖的影响_0.doc

PAGE1/NUMPAGES1

川芎嗪对胃癌细胞及血管内皮细胞增殖的影响

川芎嗪对胃癌细胞及血管内皮细胞增殖的影响【摘要】目的研究川芎嗪对SGC7901胃腺癌细胞及人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)增殖的影响。

方法将不同浓度川芎嗪分别加入体外培养的胃癌细胞，在无因子培养基和在条件培养基中培养的HUVEC中，用MTT法检测细胞增殖情况。

结果川芎嗪浓度为25～625g/mL时，对SGC7901胃腺癌细胞和无因子基培养的HUVEC增殖均无影响(P＞0.05)；川芎嗪浓度为125g/mL作用48、72h、浓度为625g/mL作用24、48、72h对条件培养基诱导的HUVEC增殖有明显影响(P＜0.05)，增殖抑制率随着药物浓度的增加和作用时间的延长而升高。

结论川芎嗪对胃腺癌细胞和血管内皮细胞无直接杀伤作用，但对条件培养基诱导的HUVEC增殖具有抑制作用。

【关键词】胃腺癌；血管内皮细胞；川芎嗪；生长抑制剂胃癌是一种常见的对人类危害较大的疾病，我国在20世纪90年代进行的全国恶性肿瘤死亡率调查表明，胃癌死亡率高居恶性肿瘤死亡率的首位［1］，目前使用手术、化疗、放疗等治疗方法存在许多局限，而且不能有效防治胃癌的转移和复发。

川芎嗪(tetramethylpyrazine，TMP)是从活血化瘀中药川芎中分离得到的一种生物碱，主要应用于缺血性心、脑血管疾病，毒副作用少。

有研究发现［2］，川芎嗪对MKN45人胃癌低分化腺癌细胞有直接的杀伤作用；张薇等［3］的研究则显示川芎嗪能抑制胃癌前病变大鼠新生血管生成，可能对胃癌具有一定的预防和治疗作用。

本文拟通过MTT比色法观察川芎嗪对胃癌细胞和血管内皮细胞增殖的影响，初步探讨川芎嗪在胃癌治疗中的作用和意义。

1材料与方法1.1材料RMPI1640培养基(美国Gibco)，SFM培养基(美国Gibco)，胎牛血清(FBS，杭州四季青)，谷氨酰胺(美国Amresco，博理分装)，重组人内皮细胞生长因子(rhECGF,美国Ramp;D)，F8兔抗人多克隆抗体、FITC羊抗兔IgG(武汉博士德)，盐酸川芎嗪注射液(常州制药厂有限公司，规格：

40mg/2mL，批号：

0403231)，MTT(美国Amersco，博理分装)。

1.2方法1.2.1胃癌细胞培养SGC7901胃腺癌细胞(购自中国科学院上海细胞库)，用RMPI1640完全培养基(加入10%胎牛血清、2mM谷氨酰胺)培养。

1.2.2HUVEC培养采用胰蛋白酶消化法分离获取［45］。

用内皮细胞培养基(含10%胎牛血清、2mM谷氨酰胺和1ng/mLrhECGF的SFM培养基)培养，传代后用第八因子相关抗原免疫荧光染色法进行鉴定。

HUVEC第3～6代用于实验。

1.2.3川芎嗪对细胞增殖影响的检测1.2.3.1对胃腺癌细胞增殖的影响SGC7901胃腺癌细胞以1104个/mL的密度接种于96孔板内，每孔接种100L，用RMPI1640完全培养基(含10%胎牛血清、2mM谷氨酰胺)培养。

培养24h后，吸弃孔中培养基。

每块培养板分4组，每组6个复孔。

正常对照组加入100L/孔RMPI1640完全培养基；川芎嗪组则将含川芎嗪25g/mL，125g/mL，625g/mL的RMPI1640培养基依次加入相应的孔中，每孔100L。

药物作用第24、48、72h取出一块培养板，MTT法检测细胞增殖情况(检测490nm处光吸收值)。

1.2.3.2对无因子培养HUVEC细胞增殖的影响HUVEC以2104个/mL的密度接种于96孔板内，每孔接种100L，用SFM完全培养基(含10%胎牛血清和2mM谷氨酰胺)培养。

培养24h后，吸弃孔中培养基。