分子生物学技术在家畜血吸虫病诊断上的应用.pdf

doi:10.3969/j.issn.1008-4754.2020.11.005

诊断是血吸虫病防治的重要组成部分，对血吸虫病诊断技术的研究与开发一直是热点方向。

近年来，我国血吸虫病的流行程度逐年降低，尤其是以控制传染源为主的综合防治策略的实施，对

我国家畜血吸虫病的诊断提出了新的要求，敏感特异的诊断技术再次成为传染源控制的中心问题。

随着分子生物学技术，特别是PCR技术的发展，血吸虫病核酸检测技术也逐步发展，并建立了部分

较好的方法。本文主要叙述了分子生物学技术在家畜血吸虫病诊断上的应用，以期家畜血吸虫病

分子生物学诊断在基层防治实践中进一步接受和推广。

PCR技术；诊断；家畜血吸虫病；应用与推广

作简介：李跻（1978—），男，分子生物学技术

宁夏永宁人，大学本科，高级兽医师，

主要从事畜牧兽医高新技术推广、重在家畜血吸虫病诊断上的应用

大动物病防控及动物疾病诊疗服

务工作。

李跻

（宁夏永宁县闽宁镇农业服务中心银川750104）

以间接血凝试验（IHA）为代表的血清学诊断技术逐步在我国2.1核糖体18SrRNA基因序列

家畜血吸虫病诊断中发挥越来越重要的作用，但其始终作为一种18SrRNA基因序列长度为1883bp，为血吸虫看家基因，拷贝

初筛的工具，不能作为确诊的依据。以粪便毛蚴孵化为代表的病原数较多，以其为靶标序列先后在日本血吸虫不同发育阶段的动物

学诊断技术是家畜血吸虫病确诊的“金标准”，但随着流行度和宿主的多种样本中检测到了特异性片段。基于该基因建立起了常

感染强度的进一步降低，其敏感性饱受诟病。检测核酸物质的方法规PCR、荧光定量PCR技术，检测限可达10fg，并且在感染的早

为家畜血吸虫病诊断开辟了新途径，在特定意上，核酸检测也属期即可检测到该靶标，提示18SrRNA靶序列的诊断价值。

于病原学检测的范畴，可作为家畜血吸虫病确诊的依据。另外，多2.2逆转录转座子SjR2

项研究证实，核酸检测具有较高的敏感性和特异性。核酸检测一般

SjR2具有高度保守和多拷贝的特点，长3,921bp，在基因组中

基于PCR技术建立，2002年，粪便PCR诊断技术首先应用于检

约有400个完整拷贝和23,755个不完全拷贝，分散在整个染色体

测曼氏血吸虫感染，其后，PCR诊断技术应用不断增多，并相继出

中，并可在血吸虫生活史多个阶段及动物宿主粪便和血清中检测

现诊断日本血吸虫和埃及血吸虫病的报道[1]。下面就将基于PCR

到。基于此靶基因建立起常规PCR、荧光定量PCR及LAMP法，其

及其延伸技术在家畜血吸虫病诊断上的应用介绍如下：

敏感性可达到80fg/μL和0.08fg/μL，并且可在感染早期扩增出特

1血吸虫核酸检测的可行性异性条带，并于治疗后一段时间转阴，除具有诊断价值外还具备疗

只要病原体存在于家畜或受体体内，机体内就会有其核酸物质效考核价值。

的存在，日本血吸虫生活史和寄生部位的特殊性决定了核酸检测技2.3线粒体基因

术的可行性。日本血吸虫尾蚴侵入家畜皮肤后转变