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生态环境学报2012，21(8)http：／／www．jeesci．com

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准好氧填埋场垃圾样品中甲烷氧化菌的群落多样性分析

张维，岳波，黄启飞，黄泽春

1．长安大学杂志社，陕西西安710064；2．中国环境科学研究院固体废物污染控制技术研究所，北京100012

摘要：为了探讨准好氧垃圾填埋场中的甲烷氧化机理，本研究利用RealTime．PCR和PCR-DGGE技术对其中的甲烷氧化菌分

别进行了定量分析和群落多样性分析。研究结果表明，PCR．DGGE技术可以用于垃圾样品中甲烷氧化菌的微生物多样性分

析；在距导气管0、2．5、5．0、10．0和15．0m处垃圾样品中甲烷氧化菌的数量分别为1．13x10、2．22x10、2．38x10、2．20x10

和5．21×10g～，呈现逐渐降低的趋势；垃圾样品中甲烷氧化菌的丰富度和香侬多样性指数依次为：0m2．5m5．0m=10．0

m15．0m，此外，垃圾样品中甲烷氧化菌可归为：Methylocaldum(甲基暖菌属)、Methylobacterium(甲基杆菌属)和

Methylocystis(~基孢囊菌属)，且优势菌种为TypeI~J_Methylocaldum。

关键词：准好氧填埋场；甲烷氧化菌；定量PCR，DGGE，多样性

中图分类号：X172文献标志码：A文章编号：1674．5906(2012)08—1462．06

甲烷是引起温室效应的主要根源之一，甲烷准好氧填埋场与厌氧填埋场相比极大地减少

的体积分数从工业革命前的0．6～0．8gLL增加到了甲烷释放。根据模型估算，准好氧填埋场气体

1992年的1．72gLL·～，增加量约为145％。如果针对温室效应的贡献能够减少45％[61。目前，由于

对减少温室气体排放没有采取相应措施，预计到能够减少甲烷排放和加速垃圾稳定化，准好氧填

2100年全球表面平均温度可能会上升0．9-3．5℃埋技术越来越受到重视，在填埋场构造和功能设

[11

。水稻田、反刍动物、垃圾堆填、煤炭开采、计，有机物降解以及稳定特性和机制等方面研究

石油与天然气工业等是人类活动中甲烷的主要释人员做了很多研究。但是，关于准好氧填埋场内

放源2【J。其中，城市生活垃圾填埋场更是重要的甲烷氧化菌群落结构的研究却未见报道。甲烷氧

甲烷释放源之--(LandfillGas，LFG)[引。Et本学者化菌(Methanotrophs)是一类以甲烷为唯一碳源和

花岛正孝于2O世纪60年代提出准好氧填埋技术，能源的细菌，是甲基营养细菌(Methylotrophic

通过填埋场渗滤液收集管网的不满流设计且在末Bacteria)的一个分支。目前，分离鉴定的甲烷氧

端与大气相通，垃圾填埋体发酵产生的温差使外化菌已有100多种ll，归属于l4个属7【J，在填埋场

界空气自然通过渗滤液收集系统和竖直井而进入甲烷减排中扮演重要的角色。近年来，分子生物

垃圾填埋层，从而使填埋场表层、集水管附近、学技术已被广泛应用于各种环境样品微生物的研

竖直井或者排气设施周围的区域处于好氧状态，究中，而利用定量PCR和PCR—DGGE技术对准好

而远离上述区域的填埋层中心部分则处于厌氧状氧填埋过程中甲烷氧化菌种群多样性和动态变化

态，好氧与厌氧区域之间则形成相应的兼性好氧的研究报道尚不多见。

区域，准好氧填埋场填埋层内的微生物可以通过本研究以甲烷氧化菌pmoA基因作为分子标

好氧分解、厌氧分解