生化理论课_第03章酶.pptVIP

（三）酶促反应的可调节性对酶生成与降解量的调节酶生物合成的诱导和阻遏；酶降解速度的调节酶催化效力的调节酶原激活（消化酶类）；酶的变构调节；共价修饰；产物的反馈抑制通过改变底物浓度对酶进行调节等*（四）酶的不稳定性酶是蛋白质，凡是能使蛋白质变性的因素（高温、强酸、强碱、重金属）都能使酶失去催化活性。酶催化反应一般在常温、常压、中性pH。工业合成氨：500℃，300大气压；生物固氮：中性pH，27℃。*二、酶通过促进底物形成过渡态而提高反应速率同所有的化学催化剂一样，酶通过降低反应的活化能（DG?）来加速反应。活化能：底物分子从初态转变到活化态所需的能量。酶与底物非共价结合，释放出结合能（DGB），酶利用此结合能降低酶促反应的活化能。*反应总能量改变非催化反应活化能酶促反应活化能一般催化剂催化反应的活化能能量反应过程底物产物酶促反应活化能的改变*酶-底物复合物的形成有利于底物转变成过渡态酶底物复合物E+SE+PES(过渡态)*酶与底物的结合是诱导契合而非锁钥模型诱导契合假说(induced-fithypothesis)酶与底物相互接近时，其结构相互诱导、相互变形和相互适应，进而相互结合。**羧肽酶的诱导契合模式底物*邻近效应(proximityeffect)与定向排列(orientationarrange)邻近指底物汇聚于酶的活性中心，使酶活性中心的底物浓度高于其它处定向则指底物的敏感化学键与酶的催化基团正好对准，使反应加速进行。酶促反应的机制（了解）*多元催化(multielementcatalysis)酶促反应通常是几个基元反应协同作用的结果，包括酸碱催化、共价催化、金属离子催化等。酶促反应的机制（了解）表面效应(surfaceeffect)酶的活性中心形成疏水性口袋，防止水分子干扰酶与底物的结合。*酶动力学研究研究酶促反应速度及其影响因素，并加以定量的阐述。影响因素包括有底物浓度、酶浓度、pH、温度、激活剂、抑制剂等。第三节酶促反应动力学※研究一种因素的影响时，其余各因素均恒定。*“酶促反应速度”指反应的初速度酶促反应速度初速度（v0）：在反应刚开始的一段时间内的反应速度。底物消耗量很小时（一般在5﹪以内）。*一、底物浓度对反应速率影响的作图呈矩形双曲线单底物、单产物反应在其他因素不变的情况下，底物浓度对反应速度的影响呈矩形双曲线关系。中间产物E+Sk1k2k3ESE+P[S]V*当底物浓度较低时反应速度与底物浓度成正比；反应为一级反应。[S]VVmax*随着底物浓度的增高反应速度不再成正比例加速；反应为混合级反应。[S]VVmax*当底物浓度高达一定程度反应速度不再增加，达最大速度；反应为零级反应[S]VVmax*中间产物解释酶促反应中底物浓度和反应速率关系的最合理学说是中间产物学说：E+Sk1k2k3ESE+P*※1913年Michaelis和Menten提出反应速度与底物浓度关系的米－曼氏方程式，简称米氏方程式(Michaelisequation)。[S]：底物浓度V：不同[S]时的反应初速度Vmax：最大反应速度(maximumvelocity)Ｋm：米氏常数(Michaelisconstant)ＶVmax[S]Km+[S]＝──*E与S形成ES复合物的反应是快速平衡反应，而ES分解为E及P的反应为慢反应，反应速率取决于慢反应即V=k3[ES]。S的总浓度远远大于E的总浓度，因此在反应的初始阶段，S的浓度可认为不变即[S]=[St]。米－曼氏方程式推导基于两个假设：*当反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度：Km值：Km＝[S]∴Km值等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度，单位是mol/L。2＝Km+[S]VmaxVmax[S]VmaxV[S]KmVmax/2*Km值意义：a)Km是酶的特征性常数之一；b)Km可近似表示酶对底物的亲和力；c)同一酶对于不同底物有不同的Km值。Vmax定义：Vmax是酶完全被底物饱和时的反应速度，与酶浓度成正比。*1.双倒数作图法(doublereciprocalp