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新辅助化疗的疗效观察及对宫颈癌组织中TRAIL死亡受体DR4、DR5表达的影响
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(1锡林浩特市医院妇产科内蒙古锡林浩特026000;2浙江省宁波大学附属医院妇产科浙江宁波315800)
R730.53A1672-5085(2012)51-0095-02
【摘要】目的探讨新辅助化疗对局部巨块型宫颈癌的疗效,及新辅助化疗前后对宫颈组织TRAIL死亡受体(DR4、DR5)表达的影响。方法选择宫颈鳞癌IB2期14例、IIA2期8例,在DSA下行选择性子宫动脉灌注顺铂100mg,每侧动脉各50mg,免疫组化SP法检测化疗前及化疗3周后宫颈癌组织中TRAIL死亡受体(DR4、DR5)表达。观察宫颈癌局部肿块在化疗前后的变化。结果新辅助化疗后局部肿块面积缩小,与化疗前比较差异有显著性;宫颈癌组织中DR4、DR5的表达量增高,与化疗前比较,差异有显著性,DR4、DR5的表达量与局部肿块面积变化无相关性。结论新辅助化疗能使肿瘤明显缩小,提高手术切除率,化疗提高宫颈癌组织TRAIL死亡受体(DR4、DR5)的表达,使TRAIL与化疗有协同作用。
【关键词】宫颈肿瘤TRAIL及其受体免疫组化法新辅助化疗
宫颈癌新辅助化疗(NACT)已广泛应用于在手术及放疗前局部巨块型宫颈癌的化疗。化疗的主要作用是诱导肿瘤细胞凋亡,通过研究凋亡诱导因子,信号途径,以及肿瘤处理过程中相关蛋白的研究,推断抗癌机制。
肿瘤细胞凋亡的调节因子中,肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配基(TRAIL)显示了与其它调节凋亡因子不同的特征,本研究通过对新辅助化疗治疗局部巨块型宫颈癌的效果观察,了解新辅助化疗前后宫颈癌组织DR4、DR5的表达,以确定TRAIL在宫颈癌组织化疗前后的凋亡作用。
1.材料与方法
1.1临床资料:研究选取2010年8月-2011年10月内蒙古锡林浩特市医院及宁波大学医学院附属医院妇产科宫颈鳞癌患者22例,FIGO分期分别为IB2期14例,IIA1期8例,可行手术治疗的患者。局部肿块最大径线大于4cm,均经临床及病理证实,17例高中分化,5例为中低分化,取化疗前活检组织及手术后标本蜡块44份。22例患者经知情同意后行子宫动脉灌注化疗一次,予双侧子宫动脉灌注顺铂各50mg,共100mg,灌注后明胶海绵栓塞。化疗前及化疗后3周,行妇科检查,超声检查,二维超声评估宫颈肿块减少的百分率以确定疗效,并检测化疗前后宫颈癌组织中DR4、DR5的表达量变化。
1.2主要试剂:多聚赖氨酸,分子量1.5-3万,sigma公司产品,DR4、DR5兔抗人多克隆抗体(SANTACRUZ公司),通用型SP法二抗试剂盒(中山公司)
1.3方法:
切片制备:常规石蜡切片片厚4-5μm,用于免疫组化检测。按照免疫组化SP法试剂盒的操作步骤进行染色。
对照用PBS代替一抗作阴性对照。DR4和DR5阳性为胞浆、胞膜棕色颗粒沉着,随机选取5个高倍视野(200X),参照文献标准[4]计数染色阳性细胞数:<5%(-);5-25%(+);25-50%(++);>50%(+++),染色阴性记为0,弱阳性记为1,阳性记为2,强阳性记为3。
2.统计学处理
定量资料数据以均数±标准差(-x±s)表示,统计计算采用SPSS10.0统计软件,进行T检验。
3.结果
经新辅助化疗一疗程后,临床100%显效,宫颈局部肿块均有不同程度的缩小,缩小百分率20%-50%,以目测结合彩超测量肿块面积,比较化疗前后肿块面积减少情况及化疗前后宫颈癌组织DR4、DR5的表达量变化。
新辅助化疗后肿块面积减少与化疗前比较,差异有显著性,P<0.05;化疗后宫颈癌组织中DR4、DR5的表达增高,与化疗前比较差异有显著性,P<0.05。宫颈癌组织中DR4、DR5的表达与局部肿块面积减少无明显相关性。
4.讨论
凋亡是细胞死亡的表现形式,是细胞重要的生理调节机制,肿瘤细胞经历凋亡、并表现特征性的形态学和生物化学改变在抗癌化疗中得到确定,因此,在肿瘤细胞凋亡和治疗机制之间有一种特定的联系。新辅助化疗使癌细胞发生细胞毒性效应:线粒体损伤发生细胞能量代谢障碍,大量自由基生成释放,通过链式反应形成活性氧,达到较高浓度时,线粒体膜非特异性通透性孔开放,启动Caspase级联反应,诱导细胞凋亡[1]。
文献报道[2]DSA下新辅助化疗经子宫动脉灌注化疗局部药物浓度较静脉化疗高5倍,肿瘤组织中的药物浓度是外周血中的4-20倍。化疗栓塞可将化疗药物溶在栓塞剂中缓慢释放,使肿瘤组织内长时间保持较高药物浓度,提高临床疗效,而且,动脉栓塞后血管阻塞,肿瘤血供障碍,促进肿瘤细胞的凋亡。
本研究子宫动脉化疗栓塞3周后,临床显效100%,进一步说明DSA下子宫动脉化疗栓塞技术是局部巨块型宫颈癌术前有效的缩瘤方法,可提高手术切除率,改善预后。对于晚期宫颈
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