实验四RNA的提取及其组分的鉴定.ppt

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实验四RNA的提取及其组分的鉴定;酵母核糖核酸的分离

及组分鉴定;

学习从酵母中提取RNA和鉴定RNA组分的方法。;二、原理:;RNA(ribonucleicacid)背景知识;RNA和DNA分别存在于细胞质和细胞核中,分离提出核酸,首先要将破碎制成匀浆、使核酸充分提取出来。;

RNA在硫酸液中煮沸可水解成核糖、嘌呤碱、嘧啶碱和磷酸,可分别进行鉴定。

;三、材料与试剂;四、实验步骤;2、RNA组分的鉴定;RNA组分的鉴定:;五思考题

1、如何得到高产量的RNA粗品?

2、本实验RNA组分是什么?怎样验证?;无水乙醇洗沉淀一次;用10ml1.5mol/L硫酸溶液小心将RNA沉淀洗至试管中,沸水浴10min,冷却后离心,然后将上清液定容至100mL,分别取1mL至两个1.5mLEp管中留做定量用,余下做定性分析。;(2)核糖

取0.5ml水解液+0.2ml苔黑酚+2ml三氯化铁盐酸溶液,沸水浴10min,观察颜色变化(亮绿色)

(3)磷酸

取0.2ml水解液+0.8ml水+1ml定磷试剂,沸水浴10min,观察颜色变化(蓝色)

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