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1.生物药物的特点?p7
1)相对分子质量的测定2)生物活性检查3)安全性检查4)效价测定5)生化法
确证结构
2.生物制品的质量检定包括哪些方面?p14
生物制品的检定一般分理化检定、安全检定、效力检定三个方面
3.生物药物常用的定量方法有哪些?p17
1)酶法2)电泳法3)理化测定法4)生物检定法
4.什么是电泳?如何对其分类,分别有哪些?p94
电泳是指带电粒子在电场中向与自身带相反电荷的电极移动的现象。
按支持物,可分纸电泳,醋酸纤维素薄膜电泳,淀粉凝胶电泳,琼脂糖凝胶电泳及
聚丙烯酰胺凝胶电泳等。按凝胶形状分有水平平板电泳、圆盘柱状电泳及垂直平板
电泳。
5.影响电泳迁移率的因素包括?p95
1)带电颗粒的性质2)电场强度3)溶液的ph值4)溶液的离子强度5)电渗作
用
6.血清蛋白常用什么电泳技术分离?核酸常用什么电泳技术分
离?p99
血清蛋白常用醋酸纤维素薄膜电泳技术分离,核酸常用琼脂糖凝胶电泳技术分离
7.为什么聚丙烯酰胺凝胶电泳是应用最广泛的凝胶电泳技术?
p100
1)聚丙烯酰胺聚合物分子中可解离的基因很少,因而电渗作用小,对样品的吸附作
用很小,容易制备,并可再生吸收。
2)凝胶的孔径可以按需要控制其大小,因而具有可拉的分子筛效应,可以根据要分
离物质分子的大小,选择适合的凝胶成分,使之既有适宜的空隙度,又有比较好的
机械性质。
3)在一定浓度范围聚丙烯暗暗对热稳定。凝胶几乎无色透明,因而电涌结果易观察,
可用检测仪直接测定。
4)丙烯酰胺是比较纯的化合物,可以精制,减少污染。
5)聚丙烯酰胺凝胶在280n波长处没有吸收,利于样品蛋白电泳后的扫描检测。
8.SDS电泳用于测定?其中SDS的作用是什么?p102
SDS电泳用于测定蛋白质的分子量。SDS的作用是使蛋白质所带的负电荷远远
超过天然蛋白分子的净电荷,消除了不同蛋白分子的电荷效应。
9.核酸在琼脂糖凝胶中的电泳迁移率取决于哪三个因素?p98
核酸在琼脂糖凝胶中的电泳迁移率取决于琼脂糖浓度、核酸分子的大小、核酸分子
的形状三个因素
10.DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时,有什么效应与什么效应?
DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时,有电荷效应与分子筛效应
11.聚丙烯酰胺凝胶电泳包括连续系统和不连续电泳,其定义和区
别分别是什么?p102web
定义区别
连续系统整个电泳系统中所用缓冲不连续系统不仅有电荷效
液,PH值和凝胶网孔都是应,分子筛效应,还具有
相同的浓缩效应,其分离条带清
不连续系统电泳系统中采用了两种或晰度及分辨率均较连续系
两种以上的缓冲液,PH值统佳
和孔径,不连续电泳能使
稀的样品在电泳工程中浓
缩成层
12.什么是分子筛效应?p95
分子筛效应:分子量或分子大小和形状不同的蛋白质通过一定的孔径分离胶时,受
阻滞的程度不同而表现出不同的迁移率,这就是分子筛效应。分子量小,阻力小,
移动快;分子量大,阻力大,移动慢。
13.什么是等电点?什么是等电聚焦?p107
等电点:蛋白质或两性电解质(如氨基酸)所带净电荷为零时溶液的pH,此时蛋白质
或两性电解质在电场中的迁移率为零。
等电聚焦:使电泳的介质中形成一定范围的pH梯度,电泳时待分离的两性分子可
以在这种pH梯度中迁移,直到聚集于与其等电点相同的区域。该技术特别适用于
分子量相近而等电点不同的蛋白质分离和分析。
14.在生物大分子的高效液相色谱分
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