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微生物工程下游工程简介;;1、微生物工程下游工程的特点;2、微生物工程下游工程的一般程序;3、主要操作单元：;二、发酵液预处理和过滤;一）发酵液的预处理;2、高价无机离子的去除;3、可溶性杂蛋白的去除;1）沉淀法;二）发酵液的过滤;?发酵液多为非牛顿流体，滤渣为可压缩性的；

?发酵液滤饼的比阻与一般可压缩滤饼相比，有其特殊性。;2、常用过滤设备;?发酵后期要少加消泡剂和少进行补料，防止消泡剂和未用完的培养基增加过滤难度；

?菌体自溶前放罐可防止因菌体自溶释放出的代谢产物增加发酵液黏度;当发酵液中有不溶性多糖时，会使发酵液的黏度增大而影响过滤速度；可用酶将其转化成可溶性单糖，提高滤速。;三）细胞破碎;?大规模破碎细胞常用方法；

?利用高压使细胞悬液通过针型阀，由于突然减压和高速冲击撞击环，造成细胞破碎。

?影响破碎的主要因素是压力、温度和循环次数;2、细胞破碎率测定;三、沉淀法（Precipitation）;?沉淀是通过改变条件或加入某种试剂，使溶液中的溶质由液相转变为固相析出的过程。

?方法简单、成本低、使用广泛，一般作为初步分离的手段；;中性盐的加入能破坏蛋白、酶等的胶体性质，中和微粒上的电荷，促使蛋白质等沉淀。;1、盐析原理——Cohn方程;盐析法分离蛋白质时，可分两类：

1）在一定的pH值和温度下，改变离子强度或盐浓度的沉淀方法——“K”分级盐析法

2）在一定离子强度下，改变溶液的pH值及温度的沉淀方法——“?”分级盐析法;2、影响盐析的主要因素;二）等电点沉淀法;三）有机溶剂沉淀法;2、优缺点;?用于生物物质沉淀的有机溶剂须能与水互溶，但对蛋白无作用；

?例如：乙醇、甲醇、丙酮、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、氯仿、乙醚等；

?乙醇是核酸、糖类、氨基酸和核苷酸等物质最常用的沉淀剂；

?在沉淀过程中，乙醇与水混合时放出大量的稀释热，使溶液的温度显著升高，这对热稳定性较差的产物影响较大（少量多次、搅拌）;四）非离子型多聚物沉淀法;离子型的多糖化合物：

酸性多糖用的较多，如羧甲基纤维素、海藻酸盐、果胶酸盐、卡拉胶等

阴离子???合物：如聚丙烯酸

阳离子聚合物：如聚乙烯亚胺等

可沉淀蛋白，作用方式类似于絮凝剂，

兼有一定的盐析和水化作用;四、溶剂萃取法(Solventextraction);一）溶剂萃取原理——分配定律;分离因素（分离系数）

若在同一体系中有两种溶质A和B，它们在相同条件下的分配常数分别为KA、KB，则分离系数?的定义为：

?=KA/KB=(CLA/CLB)/(CRA/CRB);二）有机溶剂的选择;三）影响水相溶质溶解度的因素;四）乳化与去乳化;油（有机溶剂）、水不溶→分层

表面活性剂存在可发生乳化这类表面活性剂称为乳化剂；;由于乳化剂的两性性质，能够将本不相溶的油与水连在一起，但其分子处在任何一相都是不稳定的，只有处在两相界面上时，亲水基团对着水，疏水基团对向油，在相的界面上形成单分子层时，比较稳定。乳化剂能够降低表面张力，液体容易分散成微滴而发生乳化。;CaCO3可被水浸润，但不能被有机溶剂润湿；将乳浊液通过CaCO3层时，乳浊液中的水分则被吸附。;五）萃取方式;五、离子交换法(Ionexchange);一）离子交换树脂的分类;二）离子交换树脂的命名法;例如：001×7：强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂，交联度为7

D301：弱碱性苯乙烯系大孔阴离子交换树脂;三）离子交换树脂理化指标;四）离子交换工作原理;?大分子物质要选择交联度低些的树脂，小分子物质则选用交联度高的树脂；

?由于交联度低树脂强度差、易破碎，因此，交联度选择的原则是在不影响交换容量的条件下，尽可能提高交联度。;如：当产物分子是低价离子时，增加浓度有利于交换上柱；高价离子则在较低浓度下易被吸附。;2、洗脱条件的控制;六、结晶法（crystallization）;物质从液态（液体或熔融体）或气态形成晶体的过程叫结晶。

结晶法常用于发酵产物的分离纯化;一）晶体的一般性质;?大多数物质结晶都是在溶液中进行的，所以形成的晶体中常含有一定量的结晶水。

晶体的含水量与晶体蒸汽压强有关，当晶体蒸汽压强高于大气蒸汽压强时，则风化失去结晶水。;二）晶体的结构与分类;?考虑某一特定晶体，通常选择3个主要的不平行晶面，称为结晶轴平面；

?晶轴(crystalaxis)

晶轴可互相垂直，可两轴互不垂直而垂直于第三轴，可以互相倾斜成相等的角度，也可以互相倾斜成不等的角度；

?除三晶轴平面外，可选择第四个基本平面与所有三轴相交，而此平面与三轴所截的线段可作为沿各轴