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探讨乙肝五项酶联免疫吸附法检测结果常见影响因素分析

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【摘要】目的分析乙肝五项酶联免疫吸附法检测的常见影响因素。方法将本次研究中的血清标本分成抗凝组和不抗凝组，两组标本同时进行检测，通过胶体金标法检测对其进行比较，对各组的HbsAg阳性率进行分析。结果使用酶联免疫吸附法对血清状态的HbsAg阳性率进行检测，抗凝组的阳性率明显高于不抗凝组，不抗凝组的假阳性率较低；与胶体金标法相比，酶联免疫吸附法的灵敏度较高。结论在对HbsAg进行检测时，使用酶联免疫吸附法检测可能会出现误差，造成影响的原因多样，但最主要是标本溶血，为了提升检测准确率，应当对血清标本进行必要处理。

【关键词】乙肝五项酶联免疫吸附法影响因素

R446.61A1672-5085（2014）02-0155-02

酶联免疫吸附法具有特异性好以及灵敏度较高等优点，现如今在临床上已经被广泛使用[1]。但是在实际操作过程中，各个环节对试验的最终结果影响都相对较大，若是未按常规操作，则很有可能出现假阴性或是假阳性的情况[2]。本研究旨在于探讨酶联免疫吸附法在检测HbsAg时可能出现的各种影响因素，找出产生误差的原因并采取有效措施，现将报道如下：

1.一般资料和方法

1.1一般资料

选取2011年4月-2013年10月期间我院检测的血标本共320例，根据血清标本的状态不同，分成抗凝组和不抗凝组各160例，其中男性150例，女性170例，年龄15-50岁，平均年龄（32.1±11.2）岁，所有患者均无相关肝炎病史。

1.2方法

酶联免疫吸附法的步骤以试剂说明书为准，即：阴性对照平均值×2.1≤样品A值时，判定为阳性，反之则判定为阴性；胶体金标准方法同样以试剂说明书为准，若是出现反应线和红色质控线为阳性，若是只出现红色质控线则被判定为阴性。

1.3统计学分析

本研究数据以SPSS18.0软件进行分析，计量资料以(x-±s）表示，比较以t检验；计数资料的比较经x2检验，以P0.05表示差异有统计学意义。

2.结果

对不同状态血清的HbsAg使用酶联免疫吸附法进行检测，抗凝组的阳性率明显高于不抗凝组，具备统计学意义，P＜0.05，见表1。

表1通过酶联免疫吸附法检测不同状态血清的HbsAg

组别例数阳性例数阴性例数阳性率（%）

不抗凝组1602014012.5%

抗凝组1606010037.5%

2.2通过酶联免疫吸附法对HbsAg阳性敏感率为90%（36/40），与胶体金标法检测的HbsAg阳性率敏感性相比明显较高，80%（36/45），酶联免疫吸附法的特异性85.6%（240/280），与胶体金标发相比明显较低，98.5（271/275），见表2。

表2两种方法检测HbsAg的特异性以及灵敏度比较

金标法合计

﹢-

酶联免疫吸附法﹢36945

-4271275

合3.讨论

对于乙肝病毒感染而言，乙肝病毒表面抗原是最为重要的病原标志和证据。现如今，酶联免疫吸附法已经成为判定乙型肝炎的主要手段。在对被试者进行检查时，HbsAg若呈现阴性则说明正常，最终报告结果准确性极为重要[3]。在对血液样本进行检测时，酶联免疫吸附法的操作过程会涉及到血液的留取和处理，最后通过加样、洗板、显色等一系列步骤判定最终的测试结果，在这些步骤中，每一步都会对最终的检测结果产生直接影响，稍有误差便会出现假阳性或假阴性。

本次研究中，选用不同状态的血清作为研究对象，通过结果显示，抗凝组血液样本的阳性率明显高于不抗凝组的血液样本（P＜0.05）具备统计学意义，说明不抗凝组的假阳性率较低。在对HbsAg进行检测时，出现假阳性率的根本原因是由于其中的纤维蛋白较多，导致这一情况的根本原因可能是分离不彻底或标本溶血，使最终的测试结果产生了误差。酶联免疫吸附法与胶体金标法相比，虽然特异性较低，但灵敏度却很高。

为了能够尽量避免酶联免疫吸附法产生误差，得到尽可能准确的检测结果，在测试时应当注意：1、为便于标本离心彻底，可给予血清标本抗凝血；2、确保血块浓缩，避免异物导致出现假阳性结果；3、在对血清进行离心分离时加大转速，充分离心标本，对离心时间进行延长，防止纤维蛋白或红细胞对血清样本的影响；在最后对血液样本进行加样操作时要注意手法，防止应手法不当而吸收到纤维蛋白或红细胞[4]。

简而言之，对于治疗乙型肝炎而言，乙肝五项是非常重要的指标，检验者应当在每个环节中秉承严谨认真的态度，认真做好每一个检测环节，使最终的结果真实准确，更好的为临床服务。

Reference

[1]臧勇.酶联免疫吸附法检测乙肝五项结果常见影响因素分析[J].中国实用医药,2010,24:124-125.

[2]蒋福国,薛海斌.乙肝五项酶联免疫吸附法检测结果常见影响因素分析[J].中国煤炭工业医学杂志,2013,09:10