植生实验 4叶绿体色素性质.pptVIP

三、器材与试剂

天平、研钵、剪刀、量筒、漏斗、烧杯、试管、试管架、酒精灯、试管夹、分液漏斗、分光镜、移液枪

植物叶片、丙酮、石英砂、碳酸钙、盐酸、醋酸铜、乙醚、KOH、甲醇、四氯化碳、无水硫酸钠、层析滤纸、毛细滴管

四、方法与步骤(P46-48)

1.叶绿体色素的提取

称取新鲜叶片5g，剪碎后放入研钵中加丙酮5mL，少许碳酸钙和石英砂，研磨成匀浆，再加丙酮30mL，以漏斗过滤之，即为色素提取液。放于暗处备用。

2.叶绿体色素的分离(纸层析法)

3.叶绿体色素的理化性质

（1）叶绿素的荧光现象

眼睛光源眼睛光源透射光反射光（2）光对叶绿素的破坏作用

分别取色素丙酮提取液约2ml于2支试管中，一支放于暗处，另一支放在强光下，经2-3h后，观察两支试管中溶液的颜色有何不同。

（3）铜在叶绿素分子中的替代作用

取色素丙酮提取液约3ml于试管中，一滴一滴加浓盐酸，直至溶液出现褐色。然后加醋酸铜晶体少许，用酒精灯慢慢加热试管并观察溶液颜色的变化。（4）黄色素与绿色素的分离

取色素丙酮提取液10ml，加到盛有20ml乙醚的分液漏斗中，摇动分液漏斗，并沿分液漏斗边缘加入30ml蒸馏水，轻轻摇动分液漏斗，静止片刻，溶液即分为两层。色素已全部转入上层乙醚中，弃去下层丙酮和水，再用蒸馏水冲洗乙醚溶液2次。然后于色素乙醚溶液中加入5ml30%KOH甲醇溶液，用力摇动分液漏斗，静置约10min，再加蒸馏水约10ml,用力摇动后静置分离，则得到黄色素层和绿色素层，分别收集于试管中。（5）色素溶液吸收光谱的观察

①调节分光镜，观察白炽灯光的光谱；

②色素丙酮提取液

③被光破坏的色素丙酮溶液

④铜代叶绿素溶液

⑤皂化叶绿素甲醇溶液

⑥黄色素乙醚溶液