植物细胞骨架的显示与观察.pptVIP

植物细胞骨架的显示与观察根据细胞骨架成份的蛋白质性质及其抗去垢剂抽提的特点，用戊二醛在室温下固定细胞后，经非离子型去垢剂TritonX-100处理除去膜结构和可溶性蛋白质，留下抗抽提的细胞骨架成份，用考马斯亮兰R250染色显示。植物细胞骨架的显示与观察实验目的１．加深了解细胞骨架成份的化学性质、形态分布与功能。２．掌握用考马斯亮兰显示细胞骨架系统的原理与方法。植物细胞骨架的显示与观察１．仪器、用具显微镜、载玻片、盖玻片、剪刀、镊子２．材料新鲜的洋葱鳞茎内表皮３．试剂（１）3%戊二醛固定液（２）1%TritonX-100抽提剂（３）0.2%考马斯亮兰R250染色液植物细胞骨架的显示与观察1取材：新鲜内表皮。2固定：3%戊二醛固定液，15min。水洗干净，吸干水分。3抽提：1%TritonX-100抽提剂，20min。水洗干净，吸干水分。4染色：0.2%考马斯亮兰R250染色液，20-60min。可以做多个制片，染色不同的时间观察比较。5无需或者稍微水洗，盖片，镜检。操作过程中注意材料需与试剂充分接触。植物细胞骨架的显示与观察观察时，先用低倍镜观察，可以看见细胞的核区及细胞质中的细胞骨架成份被染成兰色，成束的细胞骨架成份从核周围呈现放射状地向细胞质中延伸，找到典型的图